| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 双生病毒简介 | 第11-13页 |
| ·双生病毒的分布及危害 | 第11页 |
| ·病原致病性研究 | 第11-13页 |
| 2 双生病毒与小分子DNA形成的病害复合体 | 第13-16页 |
| ·MYVV/MYVB 及TbCSV/TbCSB 病害复合体研究进展 | 第14-15页 |
| ·双生病毒病害复合体各组分之间的互作 | 第15-16页 |
| 3 病毒间的相互作用 | 第16-18页 |
| ·协生作用 | 第16-17页 |
| ·干扰作用 | 第17-18页 |
| 4 实时荧光定量PCR技术在植物病毒中的检测应用 | 第18-23页 |
| ·实时荧光定量PCR的原理 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR的特点 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR的数据分析 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第21-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| 第三章 两种双生病毒及其伴随 β 卫星实时荧光定量PCR体系的建立与优化 | 第25-47页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| ·供试寄主植物 | 第25页 |
| ·病毒及卫星分子的侵染性克隆 | 第25页 |
| ·试剂、菌株、酶和克隆载体等 | 第25页 |
| ·常用实验仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-31页 |
| ·农杆菌介导的植株接种 | 第26页 |
| ·烟草总DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·PCR技术 | 第27-28页 |
| ·PCR产物纯化 | 第28页 |
| ·分子克隆 | 第28-29页 |
| ·序列的测定与分析 | 第29页 |
| ·标准DNA样品的制备 | 第29-30页 |
| ·qPCR条件的优化和标准曲线的建立 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-43页 |
| ·MYVV qPCR检测体系的建立及优化 | 第31-37页 |
| ·MYVB qPCR检测体系的建立及优化 | 第37-39页 |
| ·TbCSV qPCR检测体系的建立及优化 | 第39-41页 |
| ·TbCSB qPCR检测体系的建立及优化 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| 第四章 MYVV与同源卫星MYVB或异源卫星TbCSB之间的互作研究 | 第47-59页 |
| 1 实验材料 | 第47页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·病毒侵染性克隆 | 第47页 |
| ·菌株、酶和克隆载体等 | 第47页 |
| ·常用实验仪器 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-51页 |
| ·农杆菌介导的本氏烟接种 | 第47-48页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第48页 |
| ·普通PCR技术 | 第48-49页 |
| ·qPCR检测病毒积累量 | 第49-51页 |
| ·PCR产物纯化 | 第51页 |
| ·分子克隆 | 第51页 |
| ·序列的测定与分析 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-56页 |
| ·Y47A伴随Y47β 或Y35β 的侵染性及症状比较 | 第51-54页 |
| ·Y47A伴随Y47β 或Y35β 接种本氏烟后Y47A的相对积累量 | 第54-55页 |
| ·Y47A伴随Y47β 或Y35β 接种本氏烟后 β 卫星的相对积累量 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 第五章 MYVV/MYVB和TbCSV/TbCSB之间的互作研究 | 第59-67页 |
| 1 实验材料 | 第59页 |
| ·植物材料 | 第59页 |
| ·病毒侵染性克隆 | 第59页 |
| ·菌株、酶和克隆载体等 | 第59页 |
| ·常用实验仪器 | 第59页 |
| 2 实验方法 | 第59-60页 |
| ·农杆菌介导的植株接种 | 第59-60页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第60页 |
| ·普通PCR技术 | 第60页 |
| ·qPCR检测病毒积累量 | 第60页 |
| ·PCR产物纯化 | 第60页 |
| ·分子克隆 | 第60页 |
| ·序列的测定与分析 | 第60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-63页 |
| ·Y47A和Y35A同时伴随 β 卫星接种本氏烟的侵染性及症状 | 第60-61页 |
| ·接种本氏烟中各病毒及 β 卫星的积累量 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 第六章 结论与展望 | 第67-69页 |
| 1. 研究主要结论 | 第67页 |
| 2. 展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 附录A:本论文所用缩写词中英文对照 | 第75-77页 |
| 附录B:常用缓冲液、培养基及抗生素配方 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 在学期间发表和已录用论文及参加课题 | 第81页 |