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玉米萜类合成酶基因TPS10表达调控的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
缩略词表第11-13页
第一章 文献综述第13-32页
   ·植物对昆虫的间接防御机制第13-20页
     ·诱导子第13-14页
     ·信号的传导第14-15页
     ·植物激素间相互作用第15-19页
     ·萜类化合物在植物间接防御中的作用第19-20页
   ·萜类合成酶基因的研究进展第20-26页
     ·萜类合成酶基因的研究进展第20-23页
     ·玉米萜类合成酶基因的研究进展第23-26页
     ·萜类合成酶基因表达调控的研究进展第26页
   ·AP2/ERF转录因子的研究进展第26-28页
     ·AP2/ERF转录因子的结构特征和分类第26-27页
     ·AP2/ERF转录因子在生物和非生物胁迫反应中的作用第27-28页
     ·AP2/ERF转录因子在调控次级代谢产物中的作用第28页
   ·植物启动子的研究方法第28-31页
     ·启动子的生物信息学分析和预测第28-29页
     ·片段缺失转化分析第29页
     ·转录因子-启动子互作分析第29-31页
   ·研究内容及目的意义第31-32页
     ·研究内容第31页
     ·研究的目的及意义第31-32页
第二章 材料与方法第32-69页
   ·实验材料第32-39页
     ·植物材料第32页
     ·菌株和载体第32-33页
     ·拟南芥转录因子文库第33页
     ·实验所用试剂第33-34页
     ·实验所用引物第34-38页
     ·实验所用仪器设备第38-39页
   ·实验方法第39-69页
     ·植物材料的种植第39页
     ·植物材料的处理第39-40页
     ·植物基因组DNA和总RNA的提取第40-41页
     ·分子克隆方法第41-44页
     ·转基因拟南芥植株的获得第44-46页
     ·转基因拟南芥植株的GUS染色第46-47页
     ·转基因拟南芥植株的GUS酶活性测定第47-48页
     ·玉米double-stranded(ds)cDNA的制备第48-51页
     ·酵母单杂交实验第51-54页
     ·实时荧光定量PCR(qPCR)检测第54-55页
     ·EREB58蛋白的原核表达及纯化第55-56页
     ·SDS-PAGE和Western blot检测第56-57页
     ·凝胶阻滞实验第57-60页
     ·拟南芥及玉米原生质体的瞬时转化分析(PEG法)第60-64页
     ·不同玉米自交系GCC区段的PAGE检测第64-65页
     ·EREB58-OX载体和EREB58-RNAi载体的构建第65-66页
     ·转基因玉米植株的获得第66-68页
     ·玉米叶片挥发物的收集及GC-MS分析第68-69页
第三章 结果与分析第69-103页
   ·玉米TPS10基因的表达调控研究第69-97页
     ·TPS10基因表达模式的验证第69-71页
     ·生物信息学预测TPS10启动子上的顺式作用元件第71-73页
     ·TPS10P植物表达载体的构建第73-74页
     ·TPS10P转基因拟南芥的获得及检测第74-75页
     ·TPS10启动子的-300至-200区段为其保持虫害诱导活性的功能序列第75-78页
     ·酵母单杂交筛选玉米cDNA文库第78-81页
     ·高通量酵母单杂交筛选拟南芥转录因子文库第81-82页
     ·GCC-box是TPS10表达中的一个关键元件第82-83页
     ·GCC-box在不同玉米自交系的TPS10启动子中是保守的第83-84页
     ·玉米EREB58是调控TPS10表达的候选转录因子第84-88页
     ·EREB58作为转录因子定位于细胞核第88-89页
     ·EREB58特异结合TPS10启动子中的GCC-box激活基因表达第89-94页
     ·玉米中EREB58激活TPS10的表达和倍半萜挥发物的释放第94-97页
   ·玉米其他萜类合成酶基因表达调控的分析第97-103页
     ·玉米其他萜类合成酶基因及其启动子的生物信息学分析第97-99页
     ·TPS6基因表达模式的验证第99页
     ·生物信息学预测TPS6启动子上的顺式作用元件第99-101页
     ·TPS6P植物表达载体的构建及转基因拟南芥的获得和检测第101页
     ·TPS6P转基因拟南芥的GUS组织化学染色及酶活性测定第101-103页
第四章 结论与讨论第103-107页
   ·结论第103页
   ·讨论第103-107页
     ·TPS基因家族表达调控的探讨第103-104页
     ·TPS10启动子中其他顺式作用元件功能的探讨第104页
     ·GCC-box是TPS10启动子具有虫害诱导活性的一个重要元件第104-105页
     ·EREB58通过结合GCC-box调控TPS10的表达第105页
     ·EREB58的表达调控机制及其生物学功能的探讨第105-107页
参考文献第107-123页
致谢第123-125页
附录第125-149页
作者简历第149页

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