| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-23页 |
| ·实验材料 | 第13-14页 |
| ·实验细胞 | 第13页 |
| ·慢病毒载体构建 | 第13页 |
| ·实验仪器及设备 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·器材准备及主要溶液配置 | 第14-16页 |
| ·细胞培养器皿的灭菌处理 | 第14页 |
| ·去m RNA酶处理 | 第14页 |
| ·主要溶液配置 | 第14-16页 |
| ·实验方法 | 第16-22页 |
| ·细胞培养 | 第16-17页 |
| ·miR-494慢病毒及阴性对照慢病毒的构建和转染 | 第17页 |
| ·实验分组 | 第17-18页 |
| ·miR-494慢病毒感染HK-2 细胞 | 第18页 |
| ·qRT-PCR检测各组HK-2 细胞相关基因的表达 | 第18-21页 |
| ·ELISA法检测各实验组HK-2 细胞上清液IL-6、TNF-α 蛋白的表达 | 第21-22页 |
| ·流式细胞术检测各组细胞凋亡情况 | 第22页 |
| ·统计学方法 | 第22-23页 |
| 第3章 结果 | 第23-30页 |
| ·HK-2 细胞形态学观察结果 | 第23页 |
| ·慢病毒转染HK-2 细胞形态学观察结果 | 第23-24页 |
| ·Real-time PCR检测结果 | 第24-27页 |
| ·总RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·miR-494在LPS诱导HK-2 细胞中的动态表达变化 | 第24-25页 |
| ·慢病毒转染后细胞内miR-494、ATF3 m RNA的表达水平 | 第25-27页 |
| ·ELISA检测各组HK-2 细胞中IL-6、TNF-α 蛋白的表达水平 | 第27-28页 |
| ·流式细胞术检测各组HK-2 细胞凋亡率 | 第28-30页 |
| 第4章 讨论 | 第30-35页 |
| ·体外模型的建立 | 第30-31页 |
| ·LPS诱导后HK-2 的miR-494的差异性表达 | 第31-33页 |
| ·过表达miR-494调控LPS诱导的HK-2 细胞凋亡 | 第33-35页 |
| 第5章 结论与展望 | 第35-36页 |
| ·结论 | 第35页 |
| ·不足与展望 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 综述 | 第40-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
