中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-27页 |
1 C_3与 C_4光合作用 | 第12-18页 |
·C_3光合作用 | 第12页 |
·C_4光合作用 | 第12-18页 |
·C_4光合的发现 | 第12-13页 |
·双细胞 C_4光合 | 第13-15页 |
·C_4光合其他类型 | 第15-16页 |
·C_4光合相对于 C_3光合的优势 | 第16页 |
·C_4光合进化 | 第16-18页 |
2 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)的研究进展 | 第18-21页 |
·PEPC 的蛋白组成及调控 | 第18-19页 |
·PEPC 催化反应机理 | 第19-20页 |
·PEPC 的分类 | 第20-21页 |
·PEPC 的生物功能 | 第21页 |
3 C_4光合研究进展 | 第21-23页 |
4 超高 CO_2对植物生长的影响 | 第23-25页 |
5 测序技术及其应用 | 第25-27页 |
第二部分 实验论文 | 第27-62页 |
第一章 拟南芥 C_4原型的培育 | 第27-51页 |
1 实验材料 | 第27-30页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌株和质粒 | 第27页 |
·化学试剂 | 第27页 |
·实验仪器 | 第27-28页 |
·培养基 | 第28-30页 |
2 实验方法 | 第30-41页 |
·载体构建 | 第30-37页 |
·玉米叶片总 RNA 提取 | 第30-31页 |
·RNA 反转录 | 第31页 |
·基因克隆 | 第31-32页 |
·DNA 片段回收 | 第32-33页 |
·pBluescript II KS 载体连接 | 第33页 |
·大肠杆菌 DH5α感受态制备 | 第33-34页 |
·大肠杆菌转化 | 第34页 |
·质粒的提取(碱裂解法) | 第34-35页 |
·KS 载体酶切检测 | 第35页 |
·表达载体构建即连接 | 第35-36页 |
·农杆菌 GV3101 感受态的制备 | 第36页 |
·农杆菌的转化 | 第36-37页 |
·拟南芥的根瘤农杆菌转化 | 第37页 |
·菌液制备 | 第37页 |
·植物材料的培养 | 第37页 |
·转基因株系的筛选 | 第37-39页 |
·拟南芥除草剂抗性苗的筛选 | 第37-38页 |
·CTAB 法微量提取基因组 DNA | 第38页 |
·转基因抗性苗 PCR 验证 | 第38-39页 |
·转基因纯合株系的获得 | 第39页 |
·半定量检测 | 第39页 |
·PEPC 酶活检测 | 第39-40页 |
·蛋白含量测定(考马斯亮蓝法) | 第40-41页 |
3 实验所用软件及网站 | 第41-42页 |
4 实验结果与分析 | 第42-51页 |
·载体构建 | 第42-45页 |
·转基因株系的筛选及纯合株系的获得 | 第45-51页 |
·转基因株系鉴定 | 第45-47页 |
·T_3代植株酶活测定 | 第47-48页 |
·表型分析 | 第48-51页 |
第二章 C_4植物狗尾草对超高 CO_2的应激反应 | 第51-62页 |
1 实验材料 | 第51页 |
·植物材料 | 第51页 |
·化学试剂 | 第51页 |
·实验仪器 | 第51页 |
2 实验方法 | 第51-54页 |
·RNA-seq 样品准备 | 第51-52页 |
·狗尾草处理 | 第51页 |
·狗尾草 RNA 提取 | 第51-52页 |
·RNA 质量检测 | 第52页 |
·RNA-seq 测序数据的处理 | 第52-54页 |
·测序数据质量控制 | 第52-53页 |
·基因功能注释和差异基因的识别筛选 | 第53页 |
·差异表达基因的分类及功能分析 | 第53-54页 |
3 实验结果与分析 | 第54-62页 |
·植株表型观察 | 第54页 |
·植株干鲜重 | 第54-55页 |
·RNA-seq 数据结果分析 | 第55-62页 |
·RNA-seq 测序样品的准备 | 第55-56页 |
·RNA-seq 数据分析结果 | 第56页 |
·差异表达基因功能分析 | 第56-62页 |
讨论 | 第62-64页 |
后续工作 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
附录 | 第77-80页 |
附录1 中英文缩略表 | 第77-79页 |
附录2 | 第79-80页 |
附录3 | 第80页 |