| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 缩略词对照表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一部分 棕色脂肪源性干细胞的生物学特性 | 第16-26页 |
| 一、 前言 | 第16页 |
| 二、 材料和设备 | 第16-19页 |
| （一） 实验动物 | 第16页 |
| （二） 主要实验试剂 | 第16-18页 |
| （三） 主要实验设备 | 第18-19页 |
| 三、 方法 | 第19-21页 |
| （一） BASCs 的分离 | 第19页 |
| （二） 新鲜分离 BASCs 表面标志的检测 | 第19页 |
| （三） BASCs 三向分化能力的检测 | 第19-20页 |
| （四） BASCs 培养早期的细胞成分鉴定 | 第20-21页 |
| （五） 数据统计和分析 | 第21页 |
| 四、 结果 | 第21-25页 |
| （一） 新鲜分离的 BASCs 的表面标志 | 第21-22页 |
| （二） BASCs 三向分化的检测 | 第22页 |
| （三） 培养早期 BASCs 的细胞组成 | 第22-25页 |
| 五、 讨论 | 第25-26页 |
| 第二部分 棕色脂肪源性干细胞向起搏样细胞的分化 | 第26-43页 |
| 一、 前言 | 第26页 |
| 二、 材料和设备 | 第26-30页 |
| （一） 实验动物 | 第26-27页 |
| （二） 主要实验试剂 | 第27-28页 |
| （三） qPCR 引物和蛋白电泳主要溶液的配制 | 第28-29页 |
| （四） 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 三、 方法 | 第30-34页 |
| （一） BASCs 的常规培养 | 第30页 |
| （二） BASCs 增殖曲线的绘制 | 第30页 |
| （三） qPCR 检测 SAN 细胞结构基因的表达 | 第30-31页 |
| （四） Western Blot 检测蛋白水平的表达情况 | 第31-32页 |
| （五） 免疫细胞化学染色 | 第32页 |
| （六） 透射电镜观察细胞超微结构 | 第32-33页 |
| （七） 细胞内胞浆钙瞬变测定 | 第33页 |
| （八） 细胞自发动作电位记录 | 第33页 |
| （九） 药理学功能检测 | 第33-34页 |
| （十） 数据统计 | 第34页 |
| 四、 结果 | 第34-41页 |
| （一） BASCs 在分化过程中的形态学观察 | 第34-36页 |
| （二） SAN 细胞特异性结构基因在分化后 BASCs 中的表达检测 | 第36-39页 |
| （三） 分化后的 BASCs 钙瞬变检测 | 第39页 |
| （四） 分化后的 BASCs 电生理检测 | 第39-40页 |
| （五） 分化后的 BASCs 药理学功能检测 | 第40-41页 |
| 五、 讨论 | 第41-43页 |
| 第三部分 TBX18 在 BASCS 向起搏样细胞分化中的作用 | 第43-55页 |
| 一、 前言 | 第43页 |
| 二、 实验材料和设备 | 第43-46页 |
| （一） 实验动物 | 第43页 |
| （二） 主要试剂 | 第43-45页 |
| （三） qPCR 引物和蛋白电泳主要溶液的配制 | 第45-46页 |
| （四） 主要仪器设备 | 第46页 |
| 三、 方法 | 第46-50页 |
| （一） qPCR 检测 SAN 细胞分化相关转录因子的表达 | 第46-47页 |
| （二） Western Blot 检测蛋白水平的表达情况 | 第47-48页 |
| （三） BASCs 慢病毒转染实验 | 第48-49页 |
| （四） 细胞增殖活力检测 | 第49页 |
| （五） 免疫细胞化学染色 | 第49-50页 |
| （六） 数据统计 | 第50页 |
| 四、 结果 | 第50-54页 |
| （一） BASCs 在分化中 SAN 细胞分化相关转录因子的表达 | 第50-51页 |
| （二） BASCs 在 Tbx18 被干扰后的分化改变 | 第51-54页 |
| 五、 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 全文小结 | 第59-60页 |
| 创新点和意义 | 第60页 |
| 研究不足及下一步工作 | 第60页 |
| 在读期间发表的论文 | 第60-61页 |
| 文献综述 | 第61-70页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
