| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-25页 |
| ·金属调控蛋白质 | 第9-19页 |
| ·ArsR/SmtB家族 | 第11-13页 |
| ·CsoR/RcnR家族 | 第13-14页 |
| ·Fur家族 | 第14-16页 |
| ·NikR | 第16-17页 |
| ·MerR家族 | 第17-19页 |
| ·MerR家族金属调控蛋白质及其应用 | 第19-22页 |
| ·MerR | 第19-20页 |
| ·CueR | 第20-21页 |
| ·PbrR | 第21页 |
| ·基于DNA扭转调控机制的金属离子荧光探针 | 第21-22页 |
| ·CadR镉离子调控蛋白 | 第22-24页 |
| ·研究目标 | 第24-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-38页 |
| ·材料和仪器 | 第25页 |
| ·蛋白质表达体系的构建 | 第25-27页 |
| ·基因的密码子优化 | 第25-26页 |
| ·重组质粒CadR-pET30a的构建 | 第26页 |
| ·表达体系的选择 | 第26-27页 |
| ·蛋白质缺失突变体和定点突变体的构建 | 第27-29页 |
| ·蛋白质缺失突变体TC10-CadR和TC21-CadR的构建 | 第27页 |
| ·CadR定点突变体的构建 | 第27-29页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第29-31页 |
| ·His-WT-CadR的纯化 | 第29-30页 |
| ·WT-CadR的纯化 | 第30-31页 |
| ·突变体的纯化 | 第31页 |
| ·蛋白质DNA结合区域的确定 | 第31-34页 |
| ·DNA足迹分析 | 第31-33页 |
| ·CadR与启动子DNA的电泳迁移变动分析(EMSA)实验 | 第33-34页 |
| ·CadR-复合物对Cd~(2+)的稳定性实验 | 第34页 |
| ·蛋白质的晶体学实验 | 第34-36页 |
| ·WT CadR、TC10-CadR和TC21-CadR的结晶实验 | 第35页 |
| ·硒代甲硫氨酸CadR的结晶实验 | 第35-36页 |
| ·Cd-CadR复合物结晶实验 | 第36页 |
| ·CadR蛋白质与金属离子的结合性质 | 第36-38页 |
| ·配体竞争法测量CadR与Cd~(2+)反应平衡常数 | 第36-37页 |
| ·ITC实验测量Cd-CadR复合物条件稳定常数 | 第37页 |
| ·CadR与Pb~(2+)结合的紫外光谱 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第38-55页 |
| ·蛋白质表达体系的构建 | 第38-40页 |
| ·基因的密码子优化 | 第38-39页 |
| ·重组质粒CadR-pET30a的构建 | 第39页 |
| ·表达体系的选择 | 第39-40页 |
| ·蛋白质缺失突变体和定点突变体的构建 | 第40-44页 |
| ·缺失突变体TC10-CadR和TC21-CadR的构建 | 第40-41页 |
| ·定点突变体的构建 | 第41-44页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第44页 |
| ·蛋白质DNA结合区域的确定 | 第44-48页 |
| ·DNA足迹分析 | 第44-46页 |
| ·CadR与启动子DNA的电泳迁移变动分析(EMSA)实验 | 第46-47页 |
| ·CadR-复合物对Cd~(2+)的稳定性实验 | 第47-48页 |
| ·蛋白质的晶体学实验 | 第48-52页 |
| ·CadR蛋白质与金属离子的结合性质 | 第52-55页 |
| ·CadR与Cd~(2+)、Pb~(2+)的紫外吸收光谱以及Cd-CadR复合物的条件稳定常数 | 第52-53页 |
| ·ITC测量Cd-CadR复合物条件稳定常数 | 第53-55页 |
| 第四章 总结与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
