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大鼠坐骨神经损伤后背根神经节microRNA的表达变化及其功能的初步研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
符号说明第9-11页
前言第11-14页
第一章 材料与方法第14-25页
   ·实验动物第14页
   ·主要实验试剂或材料、实验仪器或软件第14-17页
   ·实验方法第17-25页
     ·坐骨神经切断模型制备第17页
     ·miRNA芯片检测第17-19页
       ·总RNA的分离第17-18页
       ·检测总RNA纯度和完整性第18页
       ·制备荧光标记探针及芯片杂交第18页
       ·图像采集和数据的处理与分析第18-19页
     ·实时定量PCR第19-22页
       ·逆转录第19-20页
       ·定量PCR第20-22页
     ·生物信息学预测靶基因第22页
     ·荧光素酶报告基因分析第22页
     ·DRG miRNA原位杂交检测第22-23页
     ·神经元培养及miRNA-145功能验证第23-24页
       ·DRG神经元培养第23页
       ·神经元处理第23-24页
       ·免疫荧光组织化学第24页
       ·神经突长度测量分析第24页
       ·Western blotting第24页
     ·统计学处理第24-25页
第二章 结果第25-38页
   ·miRNA芯片结果显示大鼠坐骨神经损伤后3d损伤侧L4-5 DRGmiRNA发生差异表达第25-28页
   ·qRT-PCR结果第28-29页
   ·miR-144、miR-145、miR-214原位杂交结果第29-31页
   ·miR-144、miR-145、miR-214靶基因的生物信息学预测结果第31-32页
   ·miR-144、miR-145、miR-214靶基因荧光素酶报告基因验证结果第32-33页
   ·miR-145抑制培养的DRG神经元神经突生长和下调Robo2蛋白表达第33-38页
     ·神经元神经突形态观察及长度测量结果第34-36页
     ·Western blotting检测结果第36-38页
第三章 讨论第38-41页
   ·周围神经损伤后miRNA的表达变化与周围神经再生第38-39页
   ·miRNA芯片在周围神经损伤后miRNA表达谱检测中的应用第39-40页
   ·周围神经损伤后miRNA对Slit-Robo-srGAP再生相关分子通路的调控作用第40-41页
第四章 结论第41-42页
参考文献第42-48页
附录 综述第48-60页
 参考文献第55-60页
致谢第60-61页
攻读学位期间主要的研究成果目录第61页

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