摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
符号说明 | 第9-11页 |
前言 | 第11-14页 |
第一章 材料与方法 | 第14-25页 |
·实验动物 | 第14页 |
·主要实验试剂或材料、实验仪器或软件 | 第14-17页 |
·实验方法 | 第17-25页 |
·坐骨神经切断模型制备 | 第17页 |
·miRNA芯片检测 | 第17-19页 |
·总RNA的分离 | 第17-18页 |
·检测总RNA纯度和完整性 | 第18页 |
·制备荧光标记探针及芯片杂交 | 第18页 |
·图像采集和数据的处理与分析 | 第18-19页 |
·实时定量PCR | 第19-22页 |
·逆转录 | 第19-20页 |
·定量PCR | 第20-22页 |
·生物信息学预测靶基因 | 第22页 |
·荧光素酶报告基因分析 | 第22页 |
·DRG miRNA原位杂交检测 | 第22-23页 |
·神经元培养及miRNA-145功能验证 | 第23-24页 |
·DRG神经元培养 | 第23页 |
·神经元处理 | 第23-24页 |
·免疫荧光组织化学 | 第24页 |
·神经突长度测量分析 | 第24页 |
·Western blotting | 第24页 |
·统计学处理 | 第24-25页 |
第二章 结果 | 第25-38页 |
·miRNA芯片结果显示大鼠坐骨神经损伤后3d损伤侧L4-5 DRGmiRNA发生差异表达 | 第25-28页 |
·qRT-PCR结果 | 第28-29页 |
·miR-144、miR-145、miR-214原位杂交结果 | 第29-31页 |
·miR-144、miR-145、miR-214靶基因的生物信息学预测结果 | 第31-32页 |
·miR-144、miR-145、miR-214靶基因荧光素酶报告基因验证结果 | 第32-33页 |
·miR-145抑制培养的DRG神经元神经突生长和下调Robo2蛋白表达 | 第33-38页 |
·神经元神经突形态观察及长度测量结果 | 第34-36页 |
·Western blotting检测结果 | 第36-38页 |
第三章 讨论 | 第38-41页 |
·周围神经损伤后miRNA的表达变化与周围神经再生 | 第38-39页 |
·miRNA芯片在周围神经损伤后miRNA表达谱检测中的应用 | 第39-40页 |
·周围神经损伤后miRNA对Slit-Robo-srGAP再生相关分子通路的调控作用 | 第40-41页 |
第四章 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
附录 综述 | 第48-60页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第61页 |