符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-25页 |
·PEDV 的形态学 | 第12-14页 |
·PEDV 的生物学特性 | 第13-14页 |
·PEDV 的分子生物学研究 | 第14-17页 |
·基因组结构特点 | 第14-15页 |
·结构蛋白 | 第15-17页 |
·非结构蛋白 | 第17页 |
·N 蛋白的特点 | 第17页 |
·PEDV 的基因分型和流行特点 | 第17-18页 |
·猪流行性腹泻病毒的流行病学 | 第18页 |
·猪流行性腹泻病毒的临床症状和病理变化 | 第18-19页 |
·临床症状 | 第18-19页 |
·病理变化 | 第19页 |
·猪流行性腹泻病毒致病机理 | 第19-20页 |
·猪流行性腹泻病毒的增殖培养 | 第20页 |
·猪流行性腹泻病毒的诊断方法 | 第20-22页 |
·根据临床症状和病理剖检变化初步诊断 | 第20页 |
·人工感染试验 | 第20页 |
·免疫电镜法(IEM) | 第20页 |
·原位杂交技术(ISH) | 第20-21页 |
·免疫荧光法 | 第21页 |
·血清中和试验 | 第21页 |
·胶体金抗体检测技术 | 第21页 |
·RT-PCR 法 | 第21页 |
·反转录环介导等温 PCR 法 | 第21-22页 |
·荧光定量 PCR 法 | 第22页 |
·ELISA 法 | 第22页 |
·PEDV 的疫苗预防和治疗 | 第22-24页 |
·疫苗预防 | 第22-24页 |
·治疗 | 第24页 |
·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-43页 |
·材料 | 第25-29页 |
·毒株和病料 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·试验中配制的试剂 | 第26-29页 |
·方法 | 第29-43页 |
·PEDV 荧光定量 PCR 方法的建立的材料与方法 | 第29-35页 |
·PEDV 的 N 蛋白基因原核表达的材料与方法 | 第35-40页 |
·PEDV N 蛋白间接 ELISA 方法建立和初步应用的材料与方法 | 第40-43页 |
3 结果与分析 | 第43-58页 |
·PEDV 荧光定量 PCR 方法的建立的结果 | 第43-47页 |
·荧光引物的 PCR 检测 | 第43页 |
·标准品的制备 | 第43页 |
·PCR 反应条件的优化 | 第43-44页 |
·标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
·灵敏性试验 | 第45页 |
·特异性试验 | 第45-46页 |
·重复性试验 | 第46页 |
·临床病料的检测结果 | 第46-47页 |
·PEDV 的 N 蛋白基因原核表达的结果 | 第47-51页 |
·PEDV N 基因 PCR 扩增 | 第47页 |
·重组质粒 pET30a-PEDVN 的鉴定 | 第47-48页 |
·重组质粒的初步表达 | 第48页 |
·诱导表达条件的优化 | 第48-50页 |
·蛋白的纯化 | 第50页 |
·Western-blot 验证表达蛋白 | 第50-51页 |
·PEDV N 蛋白间接 ELISA 方法建立和初步应用的结果 | 第51-58页 |
·间接 ELISA 方法的优化 | 第51-55页 |
·临床血清的检测 | 第55-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
·荧光定量 PCR 方法的建立和应用 | 第58页 |
·PEDV N 蛋白的原核表达和条件优化的研究 | 第58-59页 |
·PEDV N 蛋白间接 ELISA 的研究 | 第59-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
硕士期间发表文章 | 第70页 |