多不饱和脂肪酸对大鼠肠道菌群及脂肪代谢相关基因的影响
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第一章 实验材料 | 第8-11页 |
| ·实验器材 | 第8页 |
| ·试剂及基因工程酶类 | 第8-9页 |
| ·实验动物 | 第9页 |
| ·饲料配方 | 第9页 |
| ·样本和试剂 | 第9-10页 |
| ·常用软件及数据库 | 第10-11页 |
| 第二章 实验方法 | 第11-19页 |
| ·大鼠体重、体长和进食量的测定 | 第11页 |
| ·粪便样品的处理及肠道细菌总DNA的提取 | 第11页 |
| ·PCR引物 | 第11-12页 |
| ·质粒构建 | 第12-15页 |
| ·质粒、菌种、引物及测序 | 第12页 |
| ·目的基因的获取 | 第12-13页 |
| ·PCR产物的回收 | 第13页 |
| ·基因克隆文库的构建及测序 | 第13-15页 |
| ·连接反应 | 第14页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及质粒转化 | 第14页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第14-15页 |
| ·质粒提取 | 第15页 |
| ·总RNA提取 | 第15-16页 |
| ·实时定量PCR | 第16-17页 |
| ·肠道菌群的实时定量 | 第16页 |
| ·脂肪代谢相关基因的实时定量 | 第16-17页 |
| ·免疫印迹检测nesfatin-1蛋白表达水平 | 第17-18页 |
| ·蛋白样品的制备及定量 | 第17页 |
| ·蛋白免疫印迹分析 | 第17-18页 |
| ·HE染色测量肠道厚度 | 第18页 |
| ·数据处理 | 第18-19页 |
| 第三章 实验结果 | 第19-28页 |
| ·体质量、体长、进食量和附睾脂肪重量的测定结果 | 第19-20页 |
| ·肠道菌群组成变化 | 第20-23页 |
| ·肠道细菌总DNA凝胶电泳 | 第20-21页 |
| ·PCR产物、TA克隆及其鉴定 | 第21页 |
| ·肠道菌群实时定量结果 | 第21-23页 |
| ·肠道粘膜厚度 | 第23-24页 |
| ·脂肪代谢相关基因结果 | 第24-28页 |
| ·RNA提取鉴定 | 第24页 |
| ·普通PCR鉴定 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR | 第25-27页 |
| ·nesfatin-1蛋白的表达量 | 第27-28页 |
| 第四章 讨论 | 第28-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 综述 | 第38-56页 |
| 综述参考文献 | 第49-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
