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水稻钾离子通道OsAKT1生理功能及其调控机制的电生理学研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
英文縮写第10-12页
第一章 引言第12-35页
   ·钾在植物生长以及作物种植中的重要性第12-14页
     ·钾的生理功能第12-14页
     ·钾在土壤中的含量及分布第14页
   ·植物钾营养吸收的分子机制第14-15页
   ·植物钾通道和钾转运体的研究进展第15-24页
     ·钾离子通道的研究第15-16页
     ·钾离子转运体的研究第16-21页
     ·水稻钾离子通道及转运体的研究进展第21-23页
     ·其他植物中的钾离子通道及钾转运体介绍第23-24页
   ·钾离子通道和钾转运体的调控机制第24-28页
     ·转录水平调控第24页
     ·翻译后调控第24-28页
   ·电生理学技术研究离子通道简介第28-34页
     ·电生理技术第28-29页
     ·电压钳记录第29-32页
     ·电流钳技术第32-33页
     ·非损伤微测技术简介第33-34页
   ·本研究工作的立题依据和意义第34-35页
第二章 实验材料及实验方法第35-71页
   ·实验材料第35-36页
     ·水稻第35页
     ·拟南芥第35页
     ·非洲爪蟾第35页
     ·哺乳动物细胞系第35页
     ·常用菌株第35页
     ·克隆载体第35页
     ·酶、试剂盒及各种化学药品第35-36页
   ·实验仪器第36-37页
   ·研究涉及的实验方法第37-66页
     ·材料构建第37-41页
     ·植物基因表达组织定位和亚细胞定位实验第41-42页
     ·验证蛋白间互作的实验方法第42-44页
     ·转基因材料的获得(农杆菌转化法)第44-46页
     ·转基因材料的获得(基因枪转化法)第46-47页
     ·转基因材料的鉴定第47-48页
     ·低钾水培实验水稻钾含量测定第48-50页
     ·非洲爪蟾卵母细胞母细胞双电极电压钳实验第50-56页
     ·HEK293细胞膜片钳实验第56-59页
     ·HEK293细胞Western Blot检测第59-61页
     ·拟南芥根细胞膜片钳实验第61-63页
     ·水稻根细胞膜片钳实验第63-64页
     ·水稻根组织非损伤测离子流速方法第64-66页
   ·实验中所用到的引物序列第66-71页
第三章 实验结果与分析第71-106页
   ·OsAKT1组织表达分布及OsAKT1蛋白亚细胞定位第71-73页
     ·OsAKT1主要在根部表达第71-72页
     ·OsAKT1在质膜定位第72-73页
   ·osakt1突变体根组织钾离子内流速度低于Dongjin材料第73-74页
   ·osakt1突变体根细胞原生质体的内向钾电流小于Dongjin材料第74-76页
     ·水稻根细胞原生内向钾离子电流记录第74-76页
   ·osakt1/OsAKT1恢复突变材料能回复osaktl突变体的低钾敏感表型第76-79页
     ·osakt1/OsAKT1恢复突变材料准备第76页
     ·osakt1/OsAKT1恢复突变材料的低钾表型观察第76-77页
     ·osakt1/OsAKT1恢复突变材料生物量、钾含量的测定第77页
     ·osaktHOsAKTl恢复突变材料根细胞原生质体膜片甜实验第77-79页
   ·利用异源系统验证OsAKT1的钾吸收功能第79-83页
     ·akt1/OsAKT1材料根细胞原生质体内向钾电流分析第79-81页
     ·非洲爪蟾卵母细胞中检测不到OsAKT1钾离子通道活性第81-82页
     ·HEK293细胞中能检测到OsAKT1内向钾通道活性第82-83页
   ·OsCIPK23与OsAKT1、OsCBL1均能互作第83-84页
   ·OsCBL1与OsCIPK23不能在非洲爪蟾卵母细胞中激活OsAKT1第84-86页
   ·OsCIPKs与OsAKT1、OsCBL1的蛋白互作检测第86-88页
     ·OsCIPKs与OsAKT1胞内区酵母互作分析第86-87页
     ·双分子荧光互补实验检测OsCIPK3、9、19与OsAKT1的蛋白互作第87-88页
   ·OsCIPK3、9、19、23不能在非洲爪蟾卵母细胞中激活OsAKT1第88-89页
   ·OsCBL1与OsCIPK23一起表达能在HEK293细胞中增增强OsAKT1钾离子通道活性第89-92页
     ·OsCBL1与OsCIPK23能增强OsAKT1的内向钾电流第89-90页
     ·OsCBL1、OsCIPK23对OsAKT1通道活性及特性的影响第90-92页
   ·OsCIPK19也能与OsCBL1一起在HEK293细胞中增强OsAKT1钾离子通道活性第92-93页
   ·OsAKT1通道调控机制的特殊性第93-99页
   ·细胞内Ca~(2+)离子浓度对于OsAKT1活性的影响第99-101页
   ·水稻稻瘟病无毒蛋白AvrX对OsAKT1的影响第101-106页
     ·AvrX对OsAKT1通道活性及特性的影响第101-103页
     ·AvrX对OsAKT1的影响第103-106页
第四章 讨论与展望第106-115页
   ·Os01g0648000是拟南芥AKT1在水稻中同源基因OsAKT1第106-107页
   ·OsAKT1在水稻钾离子吸收中的作用第107页
   ·OsAKT1 N端序列分析第107-110页
     ·OsAKT1-N不能在非洲爪蟾卵母细胞中被OsCBL1-OsCIPK23调控介导内向钾电流第108页
     ·OsAKT1-N在HEK293细胞中具有钾通道活性第108页
     ·OsAKT1-N能与OsCIPK23互作第108页
     ·OsAKT1-N在HEK293细胞中能被OsCBL1-OsCIPK23调控增强钾通道活性第108-110页
   ·OsAKT1能在极低钾离子浓度下介导钾离子内流第110-112页
   ·OsAKT1与水稻稻瘟病之间的关系第112-113页
   ·结论第113页
   ·展望第113-115页
参考文献第115-132页
致谢第132-134页
个人简历第134页

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