| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-26页 |
| ·基因表达调控系统研究进展 | 第10-18页 |
| ·基因表达调控 | 第10页 |
| ·基因表达调控系统 | 第10-18页 |
| ·雌激素受体介导的调控系统 | 第18-21页 |
| ·雌激素（Estrogen，E） | 第18-19页 |
| ·ER | 第19-21页 |
| ·重组蛋白表达系统 | 第21-25页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第22页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第22-24页 |
| ·其它表达系统 | 第24-25页 |
| ·本课题的来源、研究思路与主要研究内容 | 第25-26页 |
| ·本课题的来源与研究意义 | 第25页 |
| ·本课题的研究思路与主要研究内容 | 第25-26页 |
| 第2章 HER 基因的获取与扩增 | 第26-37页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·实验主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·hER 基因的获取 | 第28-30页 |
| ·hER 全序列的扩增 | 第30-33页 |
| ·实验结果与分析 | 第33-35页 |
| ·MCF-7 细胞总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·重叠 PCR 三阶段目的片段扩增 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 第3章 HER、应答元件及报告基因毕赤酵母工程菌构建 | 第37-54页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第37-39页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| ·主要实验仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
| ·实验设计 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·pPIC9 和 pPIC9K 鉴定 | 第40页 |
| ·重组载体 PIC9-hER 的构建 | 第40-43页 |
| ·重组载体 pERE-CYC-PIC9K-EGFP 的构建 | 第43-45页 |
| ·重组质粒 PIC9-hER 和 ERE-CYC-PIC9K-EGFP 的鉴定 | 第45页 |
| ·含 hER 的酵母工程菌的构建 | 第45-46页 |
| ·含应答元件和报告基因的酵母工程菌的构建 | 第46-47页 |
| ·实验结果与分析 | 第47-52页 |
| ·pPIC9 和 pPIC9K 酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·pPIC9-hER 构建与鉴定 | 第48-49页 |
| ·pERE-CYC-PIC9K-EGFP 构建与鉴定 | 第49-51页 |
| ·酵母工程菌的鉴定 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第4章 雌激素受体介导的基因表达调控系统的蛋白表达鉴定与检测 | 第54-69页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第54-58页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·实验试剂 | 第54-55页 |
| ·实验主要仪器 | 第55页 |
| ·主要试剂的配制 | 第55-58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·雌激素受体的表达鉴定 | 第58-61页 |
| ·绿色荧光蛋白的诱导表达 | 第61页 |
| ·数据统计 | 第61页 |
| ·实验结果和分析 | 第61-67页 |
| ·BCA 试剂盒测定总蛋白含量 | 第61-62页 |
| ·hER 诱导表达的结果鉴定 | 第62-63页 |
| ·报告基因 EGFP 诱导表达的结果检测 | 第63-67页 |
| ·小结 | 第67-69页 |
| 第5章 结论 | 第69-70页 |
| ·研究总结 | 第69页 |
| ·需进一步开展的工作 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-82页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第82页 |
