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核盘菌激发子SsXYN的克隆、纯化及性质研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
术语与缩略语表第10-11页
1 文献综述第11-17页
   ·油菜菌核病的发生及危害第11页
   ·油菜菌核病的防治第11-13页
   ·植物-病原菌互作研究进展第13-14页
     ·基因对基因假说第13页
     ·诱饵假说第13页
     ·Zigzag 理论第13-14页
   ·激发子的种类及其信号转导第14-17页
     ·激发子种类第14页
     ·激发子引起的信号转导第14-17页
2 引言第17-19页
3 材料与方法第19-31页
   ·实验材料第19页
     ·菌种和载体第19页
     ·酶和化学试剂第19页
     ·常用缓冲溶液和培养基第19页
     ·抗生素及生长素第19页
     ·仪器设备第19页
   ·实验方法第19-31页
     ·核盘菌 NGA4菌株的培养第19-20页
     ·NGA4菌株 mRNA 的提取第20页
     ·NGA4菌丝 cDNA 的合成第20-21页
     ·常规分子克隆实验技术第21-23页
     ·油菜菌核病菌 SsXYN 基因的克隆第23-24页
     ·原核表达载体的构建第24页
     ·原核蛋白诱导表达第24页
     ·蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第24-26页
     ·His-tag 融合蛋白的亲和纯化第26页
     ·DAB 染色第26-27页
     ·烟草总 RNA 提取第27-28页
     ·烟草 cDNA 的合成第28页
     ·实时定量 PCR( qRT-PCR )检测基因的转录第28-31页
4 结果与分析第31-42页
   ·筛选可能具有激发子活性的油菜菌核病菌基因第31-32页
   ·SsXYN 基因 PCR 扩增第32页
   ·SsXYN 基因的 TA 克隆与鉴定第32-34页
   ·pET32a: SsXYN 重组质粒构建第34-35页
   ·重组载体导入大肠杆菌 BL21 感受态细胞第35-36页
   ·重组载体蛋白原核诱导第36页
   ·原核蛋白激发子活性检测第36-37页
   ·DAB 染色检测 H2O2第37-38页
   ·实时荧光定量 qRT-PCR 分析激发子对基因的表达影响第38-42页
5 讨论第42-46页
   ·木聚糖酶 SsXYN 可作为激发子诱发植物抗病反应候选基因第42页
   ·激发子 SsXYN 能够诱发烟草过敏反应第42页
   ·激发子 SsXYN 能够诱导活性氧的产生第42-43页
   ·激发子 SsXYN 能够调控不同基因的表达第43-46页
6 结论第46-47页
参考文献第47-57页
附录 A 常用缓冲液及培养基配制方法第57-58页
附录 B 常用的抗生素和诱导剂及使用浓度第58-59页
附录 C 仪器第59-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页
在读期间发表的学术论文第61页

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