摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
术语与缩略语表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-17页 |
·油菜菌核病的发生及危害 | 第11页 |
·油菜菌核病的防治 | 第11-13页 |
·植物-病原菌互作研究进展 | 第13-14页 |
·基因对基因假说 | 第13页 |
·诱饵假说 | 第13页 |
·Zigzag 理论 | 第13-14页 |
·激发子的种类及其信号转导 | 第14-17页 |
·激发子种类 | 第14页 |
·激发子引起的信号转导 | 第14-17页 |
2 引言 | 第17-19页 |
3 材料与方法 | 第19-31页 |
·实验材料 | 第19页 |
·菌种和载体 | 第19页 |
·酶和化学试剂 | 第19页 |
·常用缓冲溶液和培养基 | 第19页 |
·抗生素及生长素 | 第19页 |
·仪器设备 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-31页 |
·核盘菌 NGA4菌株的培养 | 第19-20页 |
·NGA4菌株 mRNA 的提取 | 第20页 |
·NGA4菌丝 cDNA 的合成 | 第20-21页 |
·常规分子克隆实验技术 | 第21-23页 |
·油菜菌核病菌 SsXYN 基因的克隆 | 第23-24页 |
·原核表达载体的构建 | 第24页 |
·原核蛋白诱导表达 | 第24页 |
·蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24-26页 |
·His-tag 融合蛋白的亲和纯化 | 第26页 |
·DAB 染色 | 第26-27页 |
·烟草总 RNA 提取 | 第27-28页 |
·烟草 cDNA 的合成 | 第28页 |
·实时定量 PCR( qRT-PCR )检测基因的转录 | 第28-31页 |
4 结果与分析 | 第31-42页 |
·筛选可能具有激发子活性的油菜菌核病菌基因 | 第31-32页 |
·SsXYN 基因 PCR 扩增 | 第32页 |
·SsXYN 基因的 TA 克隆与鉴定 | 第32-34页 |
·pET32a: SsXYN 重组质粒构建 | 第34-35页 |
·重组载体导入大肠杆菌 BL21 感受态细胞 | 第35-36页 |
·重组载体蛋白原核诱导 | 第36页 |
·原核蛋白激发子活性检测 | 第36-37页 |
·DAB 染色检测 H2O2 | 第37-38页 |
·实时荧光定量 qRT-PCR 分析激发子对基因的表达影响 | 第38-42页 |
5 讨论 | 第42-46页 |
·木聚糖酶 SsXYN 可作为激发子诱发植物抗病反应候选基因 | 第42页 |
·激发子 SsXYN 能够诱发烟草过敏反应 | 第42页 |
·激发子 SsXYN 能够诱导活性氧的产生 | 第42-43页 |
·激发子 SsXYN 能够调控不同基因的表达 | 第43-46页 |
6 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-57页 |
附录 A 常用缓冲液及培养基配制方法 | 第57-58页 |
附录 B 常用的抗生素和诱导剂及使用浓度 | 第58-59页 |
附录 C 仪器 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |
在读期间发表的学术论文 | 第61页 |