摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-15页 |
·鹿茸的生长发育规律 | 第9-11页 |
·鹿茸生长发育的组织结构 | 第9-10页 |
·鹿茸的再生机理 | 第10-11页 |
·鹿茸的组织发生 | 第11页 |
·鹿茸的器官形成 | 第11页 |
·鹿茸生长发育过程中的组织学特性 | 第11-12页 |
·鹿茸生长发育调控 | 第12页 |
·mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术简介 | 第12-14页 |
·DDRT-PCR技术的原理 | 第12-13页 |
·DDRT-PCR技术的发展 | 第13页 |
·DDRT-PCR技术的优点与局限性 | 第13-14页 |
·本研究的目的及意义 | 第14-15页 |
2 材料与方法 | 第15-24页 |
·样品采集 | 第15页 |
·网络资源及软件 | 第15页 |
·试剂及引物 | 第15-17页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第15-16页 |
·电泳所需溶液配方 | 第16页 |
·染色溶液的配制 | 第16-17页 |
·LB培养基的配制 | 第17页 |
·mRNA差异显示PCR引物 | 第17页 |
·仪器设备 | 第17-18页 |
·试验方法 | 第18-23页 |
·鹿茸间充质的获取 | 第18页 |
·鹿茸间充质总RNA的提取 | 第18-19页 |
·RNA纯化 | 第19-20页 |
·cDNA的合成 | 第20页 |
·DDRT-PCR反应 | 第20页 |
·8%聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20-21页 |
·银染法显色 | 第21页 |
·差异片段的切取 | 第21页 |
·差异片段的二次扩增 | 第21页 |
·二次扩增产物的回收 | 第21-22页 |
·PCR产物克隆 | 第22页 |
·Real-time PCR定量分析 | 第22-23页 |
·本章小结 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-33页 |
·RNA纯度与完整性 | 第24页 |
·mRNA差异显示结果 | 第24-26页 |
·差异片段的回收与再扩增 | 第26-27页 |
·再扩增产物的克隆及阳性克隆的鉴定 | 第27页 |
·差异片段序列的测序及同源性分析结果 | 第27-31页 |
·实时定量PCR结果 | 第31-32页 |
·RNA纯度和完整性 | 第31页 |
·LOX基因实时实时定量PCR扩增产物的电泳检测 | 第31页 |
·实时定量PCR扩增曲线 | 第31页 |
·实时定量PCR熔解曲线 | 第31-32页 |
·LOX基因表达的相对定量 | 第32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-38页 |
·应用改进的DDRT-PCR方法获得差异基因表达序列 | 第33页 |
·差异条带的筛选 | 第33页 |
·部分差异序列功能分析 | 第33-38页 |
·EST1 | 第33-34页 |
·EST2 | 第34-35页 |
·EST3与EST5 | 第35-36页 |
·EST4 | 第36-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |