| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| ·传染性造血器官坏死病病毒 | 第11-18页 |
| ·IHNV生物学特征 | 第11页 |
| ·IHNV培养增值 | 第11-12页 |
| ·IHNV临床症状 | 第12页 |
| ·IHNV流行特点 | 第12-13页 |
| ·IHNV基因组及其编码的蛋白质特征 | 第13-15页 |
| ·基因组特征 | 第13-14页 |
| ·基因编码的蛋白质特征 | 第14-15页 |
| ·IHNV分类地位 | 第15-16页 |
| ·IHNV检测手段 | 第16页 |
| ·电镜技术在水产动物病毒感染诊断中的应用 | 第16-17页 |
| ·免疫学方法在水生动物疾病中的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 传染性造血器官坏死病病毒分离鉴定及其特性的研究 | 第20-34页 |
| ·材料和方法 | 第20-26页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·检测样品 | 第20页 |
| ·细胞和培养液 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·样品制备 | 第22页 |
| ·RT-PCR及扩增产物检测 | 第22-23页 |
| ·空斑纯化试验 | 第23-24页 |
| ·病毒滴度(TCID_(50))测定 | 第24页 |
| ·病毒感染特性测定 | 第24页 |
| ·病毒生长曲线的测定 | 第24-25页 |
| ·病毒理化特性试验 | 第25页 |
| ·病毒纯化及其蛋白质电泳 | 第25页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第25-26页 |
| ·超薄切片的制备和电镜观察 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-31页 |
| ·病毒分离 | 第26页 |
| ·RT-PCR检测 | 第26-27页 |
| ·病毒感染特性试验 | 第27-28页 |
| ·理化特性的研究 | 第28页 |
| ·病毒生长曲线 | 第28-29页 |
| ·IHNV-1008毒株蛋白质电泳结果 | 第29页 |
| ·IHNV-1008间接免疫荧光结果 | 第29-30页 |
| ·IHNV-1008病毒超微形态观察 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| ·病毒毒价测定方法的选择 | 第31页 |
| ·病毒的增殖及纯化 | 第31-32页 |
| ·病毒超微形态观察 | 第32页 |
| ·病毒株型的分类 | 第32-34页 |
| 第三章 传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白抗血清的制备及应用 | 第34-50页 |
| ·材料与方法 | 第34-45页 |
| ·毒株、细胞、菌株与质粒 | 第34页 |
| ·酶及主要试剂 | 第34页 |
| ·试验溶液的配制 | 第34-36页 |
| ·试验所需基本溶液 | 第34-35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳用溶液 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE电泳用溶液 | 第35-36页 |
| ·Western Blot用溶液 | 第36页 |
| ·主要试验仪器 | 第36页 |
| ·IHNV糖蛋白基因RT-PCR扩增 | 第36-38页 |
| ·引物的设计与合成 | 第36-37页 |
| ·IHNV糖蛋白基因的扩增 | 第37页 |
| ·PCR产物的检测及回收 | 第37-38页 |
| ·重组质粒PMD18-T-G构建和筛选 | 第38-39页 |
| ·连接和转化 | 第38页 |
| ·PMD18-T-G阳性重组质粒的提取和筛选 | 第38-39页 |
| ·PMD18-T-G阳性重组质粒酶切鉴定 | 第39页 |
| ·重组表达质粒pCWori-G的构建 | 第39-41页 |
| ·目的基因与原核表达载pCWori的制备 | 第39-40页 |
| ·目的基因与原核表达载pCWori的连接 | 第40页 |
| ·连接产物转化 | 第40-41页 |
| ·重组表达质粒pCWori-G的鉴定 | 第41页 |
| ·IHNV糖蛋白诱导表达 | 第41-43页 |
| ·转化 | 第41页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第41-43页 |
| ·表达蛋白免疫原性分析 | 第43页 |
| ·IHNV糖蛋白抗血清的制备 | 第43-44页 |
| ·IHNV糖蛋白抗血清的效价测定 | 第44页 |
| ·糖蛋白抗血清对IHNV病毒的检测 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·糖蛋白基因的扩增及重组质粒的鉴定 | 第45页 |
| ·重组表达质粒pCWori-G的鉴定 | 第45-46页 |
| ·糖蛋白的诱导表达 | 第46页 |
| ·表达蛋白的复性与纯化 | 第46-47页 |
| ·表达蛋白抗原性的检测 | 第47页 |
| ·IHNV糖蛋白抗血清效价测定 | 第47-48页 |
| ·IHNV糖蛋白抗血清与全病毒反应 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |