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增强子Agamous介导Barnase基因在烟草、拟南芥花器官中特异性表达及其转化杨树的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
绪言第11-15页
第一章 引言第15-28页
   ·植物细胞核雄性不育第15-18页
     ·绒毡层与细胞核雄性不育第15-17页
     ·减数分裂与细胞核雄性不育第17-18页
   ·植物细胞质雄性不育第18-21页
     ·植物细胞质雄性不育的形成机理第18-20页
     ·植物细胞质雄性不育系统的育性调控及其机理第20-21页
   ·细胞核雄性不育(GMS)在植物育种上的应用第21-24页
     ·特异破坏花药绒毡层创造雄性不育第21-23页
     ·利用反义RNA技术获得雄性不育植株第23-24页
     ·利用核质关系创造雄性不育系第24页
   ·细胞质雄性不育(CMS)在植物育种上的应用第24-26页
   ·展望第26-28页
第二章 材料与方法第28-46页
   ·材料与试剂第28-29页
     ·供试材料第28页
     ·菌种与质粒第28页
     ·生化试剂第28页
     ·主要仪器第28-29页
   ·方法与步骤第29-46页
     ·Barnase基因的克隆第29页
     ·Agamous第二内含子的克隆第29-36页
       ·pBIN-Bar植物表达载体的构建第34-35页
       ·农杆菌重组子的鉴定第35-36页
     ·农杆菌介导的遗传转化第36-39页
     ·转基因植株的分子检测第39-42页
     ·转基因植株T_1代表型观察第42-46页
第三章 结果与分析第46-70页
   ·Barnase基因和AG第二内含子的克隆第46-49页
   ·pBIN-Bar植物表达载体的构建第49-51页
   ·热击法将pBIN-Bar导入根癌农杆菌第51页
   ·农杆菌介导法的改良第51-52页
   ·转化植株的筛选第52-59页
     ·拟南芥转化植株的筛选第52-54页
     ·烟草转化植株的筛选第54-55页
     ·美洲黑杨转化体系的建立与筛选第55-57页
     ·拟南芥再生植株的PCR检测第57页
     ·烟草再生植株的PCR检测第57-58页
     ·美洲黑杨再生植株的PCR检测第58页
     ·美洲黑杨再生植株的PCR-southern检测第58-59页
   ·转基因植株表型分析第59-62页
     ·拟南芥转基因植株的表型分析第59-60页
     ·烟草转基因植株的表型分析第60-62页
   ·转基因植株RT-PCR第62-65页
     ·拟南芥转基因植株RT-PCR第62-63页
     ·烟草转基因植株RT-PCR第63-65页
   ·烟草转基因植株花部位的组织切片第65-66页
   ·烟草转基因植株花粉镜检结果第66-67页
   ·烟草转基因植株花粉扫描电镜结果第67-68页
   ·烟草种子数目及发芽率检测第68-70页
第四章 讨论第70-73页
   ·基因工程构建林木不育品种第70页
   ·高效组培再生体系的建立第70页
   ·Barnase基因在植物基因组中整合的分析第70-71页
   ·Barnase基因表达是造成花变异,育性丧失和育性下降的直接原因,但植株的营养生长未受影响第71-73页
第五章 结论第73-74页
参考文献第74-81页
主要英文缩略词表第81-82页
常用分子生物学试剂、缓冲液及储藏液配方第82-85页
致谢第85页

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