摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第10-12页 |
材料与方法 | 第12-35页 |
1 研究对象 | 第12页 |
2 细胞 | 第12页 |
3 主要仪器与试剂 | 第12-15页 |
4 实验方法 | 第15-34页 |
·microRNA芯片检测 | 第15页 |
·生物信息学分析 | 第15-18页 |
·载体构建 | 第18-24页 |
·vESCC细胞株的培养 | 第24-25页 |
·组织和细胞中总RNA的提取(QIAGENRNeasyMiniKit) | 第25-27页 |
·逆转录反应 | 第27页 |
·miRNA-100的定量检测(qRT-PCR) | 第27-28页 |
·蛋白表达量检测 | 第28-30页 |
·人ESCC细胞转染 | 第30页 |
·细胞增殖实验(CellCountingKit-8,CCK-8) | 第30-31页 |
·细胞迁移和侵袭实验 | 第31-33页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第33页 |
·双荧光素酶报活性测定 | 第33-34页 |
5 统计学处理 | 第34-35页 |
实验结果 | 第35-53页 |
1 Microarray芯片检测ESCC中异常表达的miRNA | 第35-36页 |
2 miRNA-100与ESCC分化和转移的关系 | 第36-37页 |
3 miRNA-100过表达对ESCC细胞迁移、侵袭、增殖和凋亡的影响 | 第37-43页 |
·miRNA-100表达载体构建及转染 | 第37-38页 |
·miRNA-100过表达对ESCC细胞迁移的影响 | 第38-40页 |
·miRNA-100过表达对ESCC细胞侵袭的影响 | 第40-41页 |
·miRNA-100过表达对ESCC癌细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
·miRNA-100过表达对ESCC细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
4 miRNA-100沉默对ESCC细胞迁移、侵袭、增殖和凋亡的影响 | 第43-48页 |
·miRNA-100表达沉默对ESCC细胞迁移的影响 | 第43-45页 |
·miRNA-100表达沉默对ESCC细胞侵袭的影响 | 第45-46页 |
·miRNA-100表达沉默对ESCC细胞增殖的影响 | 第46-47页 |
·miRNA-100表达沉默对ESCC细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
5 miRNA-100参与ESCC发病的机制研究 | 第48-53页 |
·miRNA-100的生物信息学特征 | 第48-49页 |
·miRNA-100的启动子区域预测 | 第49页 |
·miRNA-100靶基因预测及靶基因的GO分析和pathway分析 | 第49-51页 |
·miRNA-100靶基因的验证 | 第51-53页 |
讨论 | 第53-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-74页 |
A 英文词汇对照 | 第62-63页 |
B 常用试剂配制 | 第63-66页 |
C 个人简历及发表文章 | 第66-68页 |
D 综述 | 第68-74页 |
参考文献 | 第73-74页 |