提要 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-16页 |
ABSTRACT | 第16-40页 |
第一章 绪论 | 第40-126页 |
·硒蛋白的研究进展 | 第40-71页 |
·硒蛋白的分类 | 第41-55页 |
·硒代半胱氨酸的生物合成机制 | 第55-64页 |
·硒代半胱氨酸插入元件 | 第64-67页 |
·硒蛋白的表达 | 第67-71页 |
·谷胱甘肽过氧化物模拟酶 | 第71-91页 |
·GPx 结构 | 第72-77页 |
·GPx 的催化机制 | 第77-79页 |
·化学合成 GPx 模拟物 | 第79-82页 |
·含硒抗体模拟 GPx | 第82-91页 |
参考文献 | 第91-126页 |
第二章 本论文立论依据 | 第126-140页 |
参考文献 | 第132-140页 |
第三章 具有催化三联体的含硒单链抗体 SE-SCFV-WUQ 通读表达系统的构建 | 第140-178页 |
·前言 | 第140-144页 |
·实验材料 | 第144-146页 |
·菌株和质粒 | 第144页 |
·主要试剂 | 第144-145页 |
·主要仪器 | 第145-146页 |
·培养基和主要溶液的配制 | 第146页 |
·实验方法 | 第146-156页 |
·含硒单链抗体通读表达突变体的结构预测及获得 | 第146-148页 |
·pPelB-Se-scFv-U 质粒的小剂量提取 | 第148-150页 |
·含硒单链抗体基因的定点突变 | 第150-152页 |
·低温 CaCl_2法制备 E. coli DH5α感受态细胞 | 第152-153页 |
·含硒单链抗体基因突变产物转化感受态细胞 | 第153-154页 |
·含硒单链抗体基因突变产物的筛选和酶切鉴定 | 第154-155页 |
·含硒单链抗体基因突变体的酶切鉴定 | 第155页 |
·含硒单链抗体突变体基因的酶切产物回收 | 第155-156页 |
·含硒单链抗体突变体基因的测序 | 第156页 |
·结果分析 | 第156-163页 |
·含硒单链抗体通读表达突变体的设计 | 第156-160页 |
·含硒单链抗体通读表达突变体的鉴定 | 第160-161页 |
·含硒单链抗体通读表达突变体基因的定点突变 | 第161-163页 |
·讨论 | 第163-170页 |
本章小结 | 第170-171页 |
参考文献 | 第171-178页 |
第四章 通读表达具有催化三联体的含硒单链抗体 SE-SCFV-WUQ | 第178-230页 |
·前言 | 第178-183页 |
·实验材料 | 第183-189页 |
·主要试剂 | 第183-184页 |
·主要仪器 | 第184-185页 |
·质粒和菌株 | 第185页 |
·主要溶液配制 | 第185-189页 |
·实验方法 | 第189-201页 |
·通读表达载体共转化感受态细胞的制备 | 第189-190页 |
·含硒单链抗体通读表达载体的共转化 | 第190-191页 |
·含硒单链抗体诱导表达条件的优化 | 第191-192页 |
·含硒单链抗体各突变体的诱导表达 | 第192-193页 |
·可溶性含硒单链抗体的纯化 | 第193-195页 |
·纯化蛋白的 Western blotting 鉴定 | 第195-197页 |
·含硒单链抗体蛋白质和硒含量测定 | 第197-199页 |
·含硒单链抗体 GPx 活力和动力学分析 | 第199-201页 |
·结果分析 | 第201-213页 |
·Se-scFv-WUQ 表达条件的优化 | 第201-207页 |
·含硒单链抗体的纯化 | 第207-208页 |
·含硒单链抗体的 Western blotting 分析 | 第208页 |
·含硒单链抗体 GPx 活性和硒含量比较 | 第208-212页 |
·含硒单链抗体动力学分析 | 第212-213页 |
·讨论 | 第213-220页 |
本章小结 | 第220-222页 |
参考文献 | 第222-230页 |
第五章 含硒单链抗体 SE-SCFV-WUQ 生物学效应研究 | 第230-258页 |
·前言 | 第230-233页 |
·SE-SCFV-WUQ 对牛心肌线粒体氧化应激损伤的保护 | 第233-237页 |
·实验材料 | 第233-234页 |
·实验方法 | 第234-235页 |
·结果与讨论 | 第235-237页 |
·SE-SCFV-WUQ 对氧化应激损伤肝细胞的生物学效应 | 第237-247页 |
·实验材料 | 第237-238页 |
·实验方法 | 第238-241页 |
·结果与讨论 | 第241-247页 |
本章小结 | 第247-248页 |
参考文献 | 第248-258页 |
第六章 GPX 模拟物 6-CYSECD 的生物学效应 | 第258-286页 |
·前言 | 第258-262页 |
·6-CYSECD 对 UVB 诱导的人永生化表皮 HACAT 细胞损伤的保护作用 | 第262-270页 |
·实验材料 | 第262-263页 |
·实验方法 | 第263-264页 |
·结果与讨论 | 第264-270页 |
·6-CYSECD 对过氧化氢诱导小鼠成纤维细胞损伤的保护作用 | 第270-276页 |
·实验材料 | 第270-271页 |
·实验方法 | 第271-272页 |
·结果与讨论 | 第272-276页 |
本章小结 | 第276-277页 |
参考文献 | 第277-286页 |
作者简介 | 第286-287页 |
攻读博士期间的科研成果 | 第287-292页 |
致谢 | 第292-295页 |