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通读表达具有催化三联体的含硒单链抗体及其生物学效应研究

提要第1-7页
中文摘要第7-16页
ABSTRACT第16-40页
第一章 绪论第40-126页
   ·硒蛋白的研究进展第40-71页
     ·硒蛋白的分类第41-55页
     ·硒代半胱氨酸的生物合成机制第55-64页
     ·硒代半胱氨酸插入元件第64-67页
     ·硒蛋白的表达第67-71页
   ·谷胱甘肽过氧化物模拟酶第71-91页
     ·GPx 结构第72-77页
     ·GPx 的催化机制第77-79页
     ·化学合成 GPx 模拟物第79-82页
     ·含硒抗体模拟 GPx第82-91页
 参考文献第91-126页
第二章 本论文立论依据第126-140页
 参考文献第132-140页
第三章 具有催化三联体的含硒单链抗体 SE-SCFV-WUQ 通读表达系统的构建第140-178页
   ·前言第140-144页
   ·实验材料第144-146页
     ·菌株和质粒第144页
     ·主要试剂第144-145页
     ·主要仪器第145-146页
     ·培养基和主要溶液的配制第146页
   ·实验方法第146-156页
     ·含硒单链抗体通读表达突变体的结构预测及获得第146-148页
     ·pPelB-Se-scFv-U 质粒的小剂量提取第148-150页
     ·含硒单链抗体基因的定点突变第150-152页
     ·低温 CaCl_2法制备 E. coli DH5α感受态细胞第152-153页
     ·含硒单链抗体基因突变产物转化感受态细胞第153-154页
     ·含硒单链抗体基因突变产物的筛选和酶切鉴定第154-155页
     ·含硒单链抗体基因突变体的酶切鉴定第155页
     ·含硒单链抗体突变体基因的酶切产物回收第155-156页
     ·含硒单链抗体突变体基因的测序第156页
   ·结果分析第156-163页
     ·含硒单链抗体通读表达突变体的设计第156-160页
     ·含硒单链抗体通读表达突变体的鉴定第160-161页
     ·含硒单链抗体通读表达突变体基因的定点突变第161-163页
   ·讨论第163-170页
 本章小结第170-171页
 参考文献第171-178页
第四章 通读表达具有催化三联体的含硒单链抗体 SE-SCFV-WUQ第178-230页
   ·前言第178-183页
   ·实验材料第183-189页
     ·主要试剂第183-184页
     ·主要仪器第184-185页
     ·质粒和菌株第185页
     ·主要溶液配制第185-189页
   ·实验方法第189-201页
     ·通读表达载体共转化感受态细胞的制备第189-190页
     ·含硒单链抗体通读表达载体的共转化第190-191页
     ·含硒单链抗体诱导表达条件的优化第191-192页
     ·含硒单链抗体各突变体的诱导表达第192-193页
     ·可溶性含硒单链抗体的纯化第193-195页
     ·纯化蛋白的 Western blotting 鉴定第195-197页
     ·含硒单链抗体蛋白质和硒含量测定第197-199页
     ·含硒单链抗体 GPx 活力和动力学分析第199-201页
   ·结果分析第201-213页
     ·Se-scFv-WUQ 表达条件的优化第201-207页
     ·含硒单链抗体的纯化第207-208页
     ·含硒单链抗体的 Western blotting 分析第208页
     ·含硒单链抗体 GPx 活性和硒含量比较第208-212页
     ·含硒单链抗体动力学分析第212-213页
   ·讨论第213-220页
 本章小结第220-222页
 参考文献第222-230页
第五章 含硒单链抗体 SE-SCFV-WUQ 生物学效应研究第230-258页
   ·前言第230-233页
   ·SE-SCFV-WUQ 对牛心肌线粒体氧化应激损伤的保护第233-237页
     ·实验材料第233-234页
     ·实验方法第234-235页
     ·结果与讨论第235-237页
   ·SE-SCFV-WUQ 对氧化应激损伤肝细胞的生物学效应第237-247页
     ·实验材料第237-238页
     ·实验方法第238-241页
     ·结果与讨论第241-247页
 本章小结第247-248页
 参考文献第248-258页
第六章 GPX 模拟物 6-CYSECD 的生物学效应第258-286页
   ·前言第258-262页
   ·6-CYSECD 对 UVB 诱导的人永生化表皮 HACAT 细胞损伤的保护作用第262-270页
     ·实验材料第262-263页
     ·实验方法第263-264页
     ·结果与讨论第264-270页
   ·6-CYSECD 对过氧化氢诱导小鼠成纤维细胞损伤的保护作用第270-276页
     ·实验材料第270-271页
     ·实验方法第271-272页
     ·结果与讨论第272-276页
 本章小结第276-277页
 参考文献第277-286页
作者简介第286-287页
攻读博士期间的科研成果第287-292页
致谢第292-295页

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