| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 插图和附表清单 | 第9-10页 |
| 主要符号列表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 引言 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·参考菌株 | 第24页 |
| ·主要培养基 | 第24页 |
| ·主要试剂及其配置 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·多重 PCR 引物设计、选择与合成 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-34页 |
| ·培养基的制备 | 第26页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取 | 第26-28页 |
| ·病料中细菌基因组 DNA 的提取 | 第28页 |
| ·普通琼脂糖凝胶 DNA 的回收 | 第28页 |
| ·猪肺炎支原体(Mhp)单一 PCR 方法的建立与优化 | 第28-31页 |
| ·多重 PCR 检测方法的建立与优化 | 第31-32页 |
| ·临床检测的应用 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·Mhp 单一 PCR 扩增条件的优化 | 第34-36页 |
| ·退火温度的优化 | 第34页 |
| ·PCR 产物测序结果及分析 | 第34页 |
| ·Mhp 单一 PCR 最佳反应体系和条件 | 第34-35页 |
| ·Mhp 单一 PCR 敏感性 | 第35页 |
| ·Mhp 单一 PCR 特异性 | 第35-36页 |
| ·Mhp、SS、HPS 和 Pm 四重 PCR 方法的建立与应用 | 第36-39页 |
| ·正交实验结果 | 第36页 |
| ·Mhp、SS、HPS 和 Pm PCR 反应体系和条件的确定 | 第36-37页 |
| ·四重 PCR 对不同模板组合的扩增 | 第37页 |
| ·四重 PCR 的敏感性 | 第37-38页 |
| ·四重 PCR 方法的特异性 | 第38页 |
| ·多重 PCR 方法重复性实验结果 | 第38-39页 |
| ·临床应用 | 第39-46页 |
| ·发病猪细菌分离培养 | 第39页 |
| ·分离株 PCR 鉴定 | 第39页 |
| ·临床疑似 PRDC 发病猪样品检测结果 | 第39-40页 |
| ·临床发病非 PRDC 猪群的检测结果 | 第40页 |
| ·临床假定健康猪四种病原菌的检测 | 第40-41页 |
| ·临床发病 PRDC 猪群与非 PRDC 猪群的检出率 | 第41-42页 |
| ·临床发病猪群与假定健康猪群的检出率 | 第42页 |
| ·138 份临床发病猪四种 PRDC 病原的检出率 | 第42页 |
| ·不同地区发病猪的检出率分布 | 第42-43页 |
| ·不同饲养阶段发病猪检出率分布 | 第43页 |
| ·四种病原混合检测情况 | 第43-44页 |
| ·四重 PCR 和单一 PCR 检测方法的符合率 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| ·四重 PCR 检测方法建立及其影响因素 | 第46-47页 |
| ·引物、反应体系、条件对四重 PCR 检测方法的影响 | 第46页 |
| ·四重 PCR 中 DNA 模板提取 | 第46-47页 |
| ·四重 PCR 方法的评估 | 第47页 |
| ·四重 PCR 检测方法的特异性和重复性 | 第47页 |
| ·临床发病猪四种病原菌检测阳性率影响因素 | 第47-48页 |
| ·四种 PRDC 病原菌流行病学调查分析 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 个人简介 | 第58页 |
| 在读期间发表论文 | 第58页 |
