| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 逆境胁迫对植物的影响 | 第12-13页 |
| ·干旱对植物的影响 | 第12-13页 |
| ·抑制生长,促进衰老 | 第12页 |
| ·降低光合作用效率 | 第12-13页 |
| ·高盐对植物的影响 | 第13页 |
| ·盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第13页 |
| ·盐胁迫对植物正常生理代谢的危害 | 第13页 |
| 2 植物耐盐、抗旱的机理 | 第13-15页 |
| ·植物抗旱机理 | 第13-14页 |
| ·渗透势的变化 | 第14页 |
| ·逆境蛋白 | 第14页 |
| ·植物耐盐机理 | 第14-15页 |
| ·拒盐机制 | 第14-15页 |
| ·渗透调节 | 第15页 |
| 3 植物抗旱、耐盐基因工程研究 | 第15-17页 |
| ·植物抗旱、耐盐功能基因研究及转基因应用 | 第15-16页 |
| ·植物抗逆转录因子基因研究及转基因应用 | 第16-17页 |
| 4 OsCBF1转录因子在小麦抗旱、耐盐改良育种中的应用前景 | 第17-19页 |
| 5 MANGRIN功能基因在小麦抗旱、耐盐改良育种中的应用前景 | 第19-20页 |
| 6 植物遗传转化的方法 | 第20-24页 |
| ·载体转化法 | 第20-21页 |
| ·病毒介导法 | 第20-21页 |
| ·农杆菌介导法(Agrobacterium tumefacens) | 第21页 |
| ·化学诱导DNA直接插入法 | 第21-22页 |
| ·PEG介导法(PEG-mediated) | 第21页 |
| ·脂质体介导法(liposomes-mediated) | 第21-22页 |
| ·物理诱导DNA直接插入法 | 第22-24页 |
| ·电击法(electroporation) | 第22页 |
| ·超声波介导法(Ultrasound-mediated) | 第22页 |
| ·显微注射法(microinjection) | 第22页 |
| ·花粉管通道法(pollen-tube pathnay) | 第22-23页 |
| ·基因枪法(micro projectile bombardment) | 第23-24页 |
| 7 本研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 基因枪法介导的OSCBF1、MANGRIN基因小麦转化 | 第25-38页 |
| 1 前言 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-31页 |
| ·植物材料 | 第25-26页 |
| ·化学试剂、酶制剂及试剂盒 | 第26页 |
| ·质粒载体 | 第26页 |
| ·质粒DNA的繁殖、提取 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA的繁殖 | 第26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·微弹制备、包裹及基因枪轰击 | 第27-28页 |
| ·微弹制备 | 第27页 |
| ·微弹包被 | 第27-28页 |
| ·基因枪轰击 | 第28页 |
| ·转化后的组织培养、筛选及植株再生 | 第28页 |
| ·再生植株的分子鉴定与分析 | 第28-31页 |
| ·再生植株基因组DNA提取 | 第28-29页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第29-31页 |
| ·分化率和转化率统计 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·幼胚愈伤组织的诱导、分化及转基因植株的再生 | 第31-33页 |
| ·转化结果 | 第33页 |
| ·再生小麦植株基因组DNA浓度 | 第33页 |
| ·再生小麦PCR检测 | 第33-36页 |
| ·转OsCBF1基因T_0代再生植株PCR扩增 | 第33-35页 |
| ·转Mangrin基因T_0代植株PCR扩增 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 转OSCBF1基因T_1代植株的基因表达及抗逆性 | 第38-57页 |
| 1 前言 | 第38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·外源基因在转基因植株中的表达 | 第39-41页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·化学试剂、酶制剂及试剂盒 | 第39页 |
| ·转基因植株总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·cDNA的合成 | 第40页 |
| ·cDNA的PCR检测 | 第40页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第40-41页 |
| ·转基因植株T_1代生理指标测定 | 第41-45页 |
| ·材料及试剂 | 第41页 |
| ·材料准备 | 第41-42页 |
| ·脯氨酸(Pro)含量的测定(茚三酮法) | 第42-43页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定(TBA法) | 第43-44页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的测定(愈创木酚法) | 第44页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定(NBT法) | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-53页 |
| ·OsCBF1基因的表达 | 第45-48页 |
| ·T_1代转基因阳性植株总RNA | 第45-46页 |
| ·OsCBF1基因在阳性植株中的表达 | 第46-47页 |
| ·实时荧光定量PCR表达量分析 | 第47-48页 |
| ·转基因植株T_1代生理指标测试结果 | 第48-53页 |
| ·Pro含量的测定 | 第48-49页 |
| ·MDA含量的测定 | 第49-50页 |
| ·POD活力的测定 | 第50-51页 |
| ·SOD活力的测定 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 各类试剂的配制 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
