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逆基因中内含子的鉴定与分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 序论第10-30页
   ·逆基因第10-11页
     ·逆转座与逆基因第10-11页
     ·逆基因的功能化第11页
   ·基因中内含子的产生机制第11-26页
     ·内含子第11-12页
     ·内含子的分类第12页
     ·内含子的起源和生物学功能第12-14页
     ·内含子的丢失和获得及其机制第14-22页
     ·内含子的获得和丢失在真核生物间存在差异第22-23页
     ·内含子丢失的选择优势第23-24页
     ·复杂基因组中内含子的获得和保持第24-25页
     ·内含子利用率在不同的基因间存在差异第25-26页
     ·内含子在生命之树上的古老进化历史第26页
   ·研究背景和研究目的第26-28页
     ·研究背景第26-27页
     ·研究目的和意义第27页
     ·主要研究内容第27-28页
   ·技术路线第28-30页
2 实验材料与方法第30-38页
   ·获得内含子的逆基因的搜寻第30页
   ·寻找转录证据确认逆基因结构第30页
   ·Ka 和 Ks 的计算第30-31页
   ·部分逆基因及其母基因的 RNA 水平的表达证据第31-36页
     ·分析的工具软件第31页
     ·主要试剂和耗材第31页
     ·主要溶液及其配制第31-32页
     ·主要仪器设备第32页
     ·引物的设计第32-33页
     ·人类不同组织样本 RNA 的提取和 cDNA 模板的制备第33-34页
     ·PCR 反应体系第34-35页
     ·PCR 产物回收第35页
     ·克隆及测序第35-36页
   ·获得内含子的逆基因的蛋白表达证据第36页
   ·内含子化逆基因的年龄估算第36页
   ·剪接位点的探测方法第36-38页
3 结果与分析第38-60页
   ·搜寻获得新内含子的逆基因第38页
   ·获得新内含子的逆基因的鉴定第38-45页
   ·逆基因获得新内含子的机制第45-50页
     ·逆基因通过外源片段插入获得内含子第46页
     ·逆基因通过转录方向的改变获得内含子第46-47页
     ·逆基因通过外显子内含子化获得内含子第47-50页
   ·逆基因通过潜在的剪接位点发生内含子化第50-54页
   ·非框架漂移在内含子化逆基因的进化中有很高的成功率第54页
   ·内含子化更易发生在年轻的逆基因中第54-57页
   ·获得内含子的逆基因的进化速率第57-60页
4 讨论第60-64页
   ·人类基因组中的逆基因数目第60页
   ·逆基因的研究有助于理解内含子获得机制第60-62页
   ·获得内含子有助于逆基因功能化第62-64页
5 结论与展望第64-66页
致谢第66-68页
参考文献第68-78页
附录第78-112页
 A 作者在攻读博士学位期间发表的论文第78页
 B 作者在攻读博士学位期间参加的研究课题第78-79页
 C 部分逆基因的转录证据第79-83页
 D 逆基因内含子部分对应的母基因的转录注释第83-93页
 E 获得内含子的逆基因与其对应母基因蛋白质序列的比对结果第93-101页
 F 获得内含子的逆基因与其对应母基因核苷酸序列的比对结果第101-109页
 G.逆基因 XXyac-R12DG2.2, CSMD3 和 WBP2NL 在人类基因组中位置第109-111页
 H 逆基因在不同人类群体中的遗传变异第111-112页

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