| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-16页 |
| 1 甲壳动物渗透的研究进展 | 第13-16页 |
| ·甲壳动物的渗透调节器官 | 第13-14页 |
| ·甲壳动物离子转运酶 | 第14-15页 |
| ·甲壳动物在环境胁迫下渗透调节的研究进展 | 第15-16页 |
| 第二章 盐度变化下凡纳滨对虾差异表达基因的筛选与鉴定 | 第16-35页 |
| 第一节 凡纳滨对虾在盐度变化下 CDNA 消减文库的构建 | 第16-30页 |
| 1 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·实验所用试剂 | 第17-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·盐度胁迫实验 | 第20-21页 |
| ·总 RNA 的提取及差异消减杂交 | 第21-28页 |
| ·基因分析方法 | 第28-29页 |
| ·所得基因序列的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29页 |
| 3 讨论 | 第29-30页 |
| 第二节 凡纳滨对虾在盐度变化下差异基因的表达分析 | 第30-35页 |
| 1 材料与方法 | 第30-33页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·实验所用试剂 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-31页 |
| ·盐度胁迫实验 | 第30-31页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第31页 |
| ·cDNA 的合成 | 第31页 |
| ·实时定量 PCR 检测选定基因的表达 | 第31-33页 |
| ·标准曲线制作 | 第31-32页 |
| ·实时定量 PCR 检测选定基因的表达 | 第32页 |
| ·数据处理与分析 | 第32-33页 |
| 2 结果 | 第33-34页 |
| ·盐度变化后基因的表达变化 | 第33-34页 |
| ·与渗透及免疫相关基因表达量的变化 | 第33页 |
| ·与代谢相关基因表达量的变化 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 凡纳滨对虾和三疣梭子蟹碳酸酐酶基因的克隆与序列分析 | 第35-65页 |
| 第一节 凡纳滨对虾碳酸酐酶基因的克隆与序列分析 | 第35-51页 |
| 1 材料与方法 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·实验用引物 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·盐度胁迫实验 | 第37页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
| ·Lv CA 片段的克隆 | 第38-39页 |
| ·3’RACE 及 5’RACE | 第39-40页 |
| ·CA 基因序列的生物信息学分析 | 第40页 |
| ·实时定量 PCR 检测盐度变化下 CA 基因的表达 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-49页 |
| ·Cac 全长及 CAg 片段 cDNA 的克隆 | 第41页 |
| ·CAc、CAg cDNA 的序列分析 | 第41-43页 |
| ·LvCAc 及 LvCAg 基因的同源性分析 | 第43-46页 |
| ·CA 氨基酸序列的进化树分析 | 第46-47页 |
| ·CAc 及 CAg 的组织特异性 | 第47-48页 |
| ·盐度变化后 CAc 及 CAg 的表达变化 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第二节 三疣梭子蟹碳酸酐酶基因的克隆与序列分析 | 第51-65页 |
| 1 材料与方法 | 第51-54页 |
| ·实验材料 | 第51-53页 |
| ·实验动物 | 第51-52页 |
| ·实验用引物 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第53页 |
| ·CAc、CAg 片段的克隆 | 第53页 |
| ·5 ’RACE | 第53-54页 |
| ·PtCAc、PtCAg 基因序列的生物信息学分析 | 第54页 |
| ·实时定量 PCR 检测 CA 基因的表达 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-62页 |
| ·PtCAc、PtCAg cDNA 的克隆 | 第54-55页 |
| ·PtCAc、PtCAg cDNA 的序列分析 | 第55-57页 |
| ·CAc 及 CAg 基因的同源性分析 | 第57-59页 |
| ·CA 氨基酸序列的进化树分析 | 第59-60页 |
| ·CAc 及 CAg mRNA 的组织特异性 | 第60-61页 |
| ·盐度变化后 CAc 及 CAg mRNA 的表达变化 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
