| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| ·高等植物中的 Ca~(2+)结合蛋白 | 第12-14页 |
| ·钙调素类蛋白 | 第12-13页 |
| ·CDPK 家族 | 第13-14页 |
| ·CBL 家族及其结构特征 | 第14页 |
| ·CBL/CIPK 信号转导途径简介 | 第14-18页 |
| ·CIPK 的结构特征 | 第14-16页 |
| ·CBL CIPK 信号系统与植物的抗逆性 | 第16-18页 |
| ·CBL CIPK 信号通路的激活 | 第16页 |
| ·CBL/CIPK 的互作 | 第16-17页 |
| ·CBL/CIPK 的亚细胞定位 | 第17页 |
| ·不同 CBL/CIPK 组合的功能分析 | 第17-18页 |
| ·研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 5 个 ZmCIPKs 基因在玉米中的表达分析 | 第19-33页 |
| ·材料与方法 | 第19-24页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·玉米材料 | 第19页 |
| ·各种耗材、酶及试剂 | 第19-20页 |
| ·常用缓冲液及试剂配制方法 | 第20页 |
| ·实验中所用引物 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·不同胁迫处理： | 第21页 |
| ·玉米总 RNA 的提取与纯化 | 第21-23页 |
| ·反转录合成 cDNA 第一链 | 第23页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-32页 |
| ·5 个 ZmCIPKs cDNA 序列分析 | 第24-25页 |
| ·5 个基因 cDNA 全长与其基因组序列比对分析 | 第25页 |
| ·5 个 ZmCIPKs 蛋白与其它植物 CIPK 蛋白的进化关系分析 | 第25-27页 |
| ·5 个 ZmCIPKs 基因的表达特性分析 | 第27-32页 |
| ·结论与讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 ZmCIPK8 基因的克隆与序列分析23 | 第33-51页 |
| ·材料与方法 | 第33-41页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·各种耗材，酶及试剂 | 第33页 |
| ·常用培养基和溶液的配制 | 第33-34页 |
| ·实验中所用引物（表 3-1） | 第34页 |
| ·菌株和载体 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-41页 |
| ·玉米总 RNA 的提取与纯化 | 第34-35页 |
| ·反转录合成第一链 cDNA | 第35页 |
| ·玉米叶片基因组 DNA 提取与纯化 | 第35-36页 |
| ·ZmCIPK8 cDNA 全长获得 | 第36页 |
| ·PCR 产物的回收纯化（用 GenClean 琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒） | 第36-37页 |
| ·回收 DNA 片段与 pMD-19T 载体连接 | 第37页 |
| ·连接产物对大肠杆菌的转化 | 第37-38页 |
| ·质粒 DNA 提取 | 第38-40页 |
| ·质粒双酶切鉴定及测序 | 第40页 |
| ·序列同源性及系统进化分析 | 第40-41页 |
| ·启动子序列分析 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-49页 |
| ·ZmCIPK8 cDNA 全长序列克隆及序列分析 | 第41-47页 |
| ·ZmCIPK8 启动子序列克隆及功能分析 | 第47-49页 |
| ·结论与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 玉米 ZmCIPK8 基因转化烟草 | 第51-71页 |
| ·材料与方法 | 第51-59页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·植物材料及培养 | 第51页 |
| ·各种耗材、酶及试剂 | 第51页 |
| ·载体及宿主菌 | 第51页 |
| ·常用培养基和溶液的配制 | 第51-52页 |
| ·实验中所用引物 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-57页 |
| ·扩增 ZmCIPK8 的编码区 cDNA，引入酶切位点 | 第52页 |
| ·构建 pBI121-ZmCIPK8 重组载体 | 第52-53页 |
| ·ZmCIPK8 基因与 pBI 121 载体片段的连接、转化 | 第53页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第53-54页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌及阳性克隆的鉴定 | 第54页 |
| ·ZmCIPK8 叶盘法转化烟草 | 第54-56页 |
| ·转基因株系的筛选与鉴定 | 第56页 |
| ·CTAB 法小量提取烟草总 DNA | 第56-57页 |
| ·生理生化指标测定方法 | 第57-59页 |
| ·叶绿素含量 | 第58页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）活性 | 第58页 |
| ·丙二醛（MDA）含量 | 第58页 |
| ·脯氨酸（Pro）含量 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-69页 |
| ·植物过表达载体的构建及转化农杆菌 | 第59-60页 |
| ·过表达 ZmCIPK8 的转基因烟草株系的筛选与鉴定 | 第60-61页 |
| ·转基因株系的表型鉴定 | 第61-63页 |
| ·生理生化指标结果 | 第63-68页 |
| ·转基因和野生型烟草中叶绿素含量 | 第63-64页 |
| ·转基因和野生型烟草中丙二醛（MDA）含量 | 第64-65页 |
| ·转基因和野生型烟草中超氧化物歧化酶（SOD）含量 | 第65-67页 |
| ·转基因和野生型烟草中脯氨酸（Pro）含量 | 第67-68页 |
| ·逆境相关基因的表达分析 | 第68-69页 |
| ·结论与讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
