| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| ·蛋白质组学研究 | 第11-14页 |
| ·蛋白质组概念和研究方法 | 第11-13页 |
| ·样品制备 | 第11-12页 |
| ·双向电泳 | 第12页 |
| ·蛋白检测 | 第12-13页 |
| ·图像扫描和分析 | 第13页 |
| ·测序技术 | 第13页 |
| ·植物蛋白质组学研究进展 | 第13-14页 |
| ·植物结构相关的蛋白质组学 | 第13-14页 |
| ·植物遗传与发育相关的蛋白质组学 | 第14页 |
| ·植物胁迫相关的蛋白质组学 | 第14页 |
| ·巴西橡胶树产排胶生物学研究 | 第14-18页 |
| ·巴西橡胶树的生物学背景 | 第14-15页 |
| ·巴西橡胶树的产胶排胶机制的研究 | 第15-18页 |
| ·橡胶树蛋白质组学研究 | 第18-19页 |
| ·胶乳的蛋白质组学 | 第18-19页 |
| ·橡胶树其它组织的蛋白质组学 | 第19页 |
| ·立题依据 | 第19-21页 |
| ·本研究的技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-40页 |
| ·胶乳C-乳清双向电泳蛋白样品制备的优化 | 第22-27页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·生物信息学软件 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·胶乳组分的分级分离 | 第23页 |
| ·蛋白样品制备 | 第23页 |
| ·TCA/丙酮法 | 第23页 |
| ·TCA/丙酮-双乙法 | 第23页 |
| ·蛋白溶解 | 第23页 |
| ·普通溶解方法 | 第23页 |
| ·超声助溶溶解方法 | 第23页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第23-24页 |
| ·蛋白质双向电泳 | 第24-26页 |
| ·第一向固相pH梯度等电聚焦(IEF) | 第24-25页 |
| ·胶条平衡 | 第25页 |
| ·第二向垂直平板SDS-PAGE | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·操作过程 | 第26页 |
| ·凝胶染色 | 第26-27页 |
| ·银染色 | 第26-27页 |
| ·考染色 | 第27页 |
| ·候选胶乳再生相关蛋白的分离与质谱鉴定 | 第27-29页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·生物信息学软件 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·胶乳组分的分级分离 | 第27页 |
| ·蛋白样品制备 | 第27页 |
| ·C-乳清蛋白质的溶解 | 第27页 |
| ·蛋白质含量测定和双向电泳程序 | 第27页 |
| ·凝胶染色 | 第27-28页 |
| ·凝胶图像扫描与分析 | 第28页 |
| ·蛋白点的获取 | 第28页 |
| ·蛋白质的原位酶解 | 第28-29页 |
| ·质谱鉴定 | 第29页 |
| ·部分胶乳再生候选相关蛋白编码基因的克隆 | 第29-40页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·胶乳、菌株与质粒 | 第29页 |
| ·试剂、耗材与溶液 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-39页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-39页 |
| ·胶乳RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·RNA甲醛变性电泳检测 | 第31页 |
| ·总RNA中微量DNA的去除 | 第31页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第31-32页 |
| ·基因扩增 | 第32-35页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增产物片段的亚克隆与重组子筛选 | 第36页 |
| ·碱法小量提取质粒 | 第36-37页 |
| ·割胶对部分差异蛋白点编码基因表达的影响 | 第37-39页 |
| ·胶乳产量和胶乳生理参数随割次的变化 | 第39-40页 |
| ·胶乳产量测定 | 第39页 |
| ·胶乳总固形含量(TSC)和转化酶测定 | 第39页 |
| ·胶乳蔗糖含量(mmol/L)测定 | 第39页 |
| ·硫醇含量(mmol/L)测定 | 第39页 |
| ·无机磷含量(mmol/L)测定 | 第39-40页 |
| 3 结果和分析 | 第40-69页 |
| ·胶乳C-乳清蛋白样品的制备优化 | 第40-41页 |
| ·不同割次胶乳C-乳清蛋白的表达谱及差异表达蛋白点的分离鉴定 | 第41-58页 |
| ·胶乳产量和生理参数随割次的变化 | 第41-43页 |
| ·不同刀次C-乳清蛋白的双向电泳分离 | 第43-44页 |
| ·差异蛋白点的选取 | 第44-46页 |
| ·差异蛋白点的质谱鉴定与蛋白功能分类 | 第46-58页 |
| ·部分差异表达蛋白编码基因的cDNA克隆 | 第58-60页 |
| ·部分差异表达蛋白编码基因随刀次变化荧光定量表达分析 | 第60-69页 |
| ·复割树开割后前八刀胶乳RNA的纯度与完整性 | 第60-61页 |
| ·基因随刀次变化荧光定量表达分析 | 第61-69页 |
| 4. 结论 | 第69-71页 |
| 5. 讨论 | 第71-75页 |
| ·糖的供给与利用调控是决定胶乳再生能力的物质基础 | 第71-72页 |
| ·胁迫与防御应答反应是影响胶乳再生能力的重要因素 | 第72-73页 |
| ·乙烯信号传导途径在胶乳再生调控中起重要作用 | 第73页 |
| ·蛋白与基因表达模式不一致的可能原因 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 致谢 | 第85页 |