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巨型艾美球虫免疫原性相异株间消减cDNA文库的构建及其差异表达基因分析

中文摘要第1-4页
Abstract第4-7页
目录第7-9页
符号说明第9-11页
文献综述第11-33页
 一、cDNA文库及其在鸡球虫研究中的应用第11-14页
 二、抑制消减杂交技术及其应用第14-22页
 三、cDNA文库阳性克隆中差异表达基因的筛选方法第22-27页
 参考文献第27-33页
第一章 巨型艾美球虫上海株与南通株间消减cDNA文库的构建第33-55页
 1 材料与方法第33-47页
   ·实验动物第33-34页
   ·实验虫株与菌株第34页
   ·主要试剂第34页
   ·主要仪器第34页
   ·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊的收集与纯化第34-35页
   ·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊总RNA的提取与检测第35-37页
   ·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊mRNA的提纯与纯度检测第37-38页
   ·抑制消减杂交第38-45页
   ·E.maxima未孢子化卵囊阶段消减cDNA文库的构建第45-47页
   ·消减cDNA文库重组率及插入片段长度分析第47页
 2 结果与分析第47-52页
   ·E.maxima未孢子化卵囊的收集与纯化第47-48页
   ·E.maxima未孢子化卵囊总RNA的提取第48页
   ·接头连接效率分析第48-50页
   ·抑制消减杂交第二轮PCR产物第50-51页
   ·消减cDNA质粒文库重组率与插入片段长度分析第51-52页
 3 讨论第52-54页
 参考文献第54-55页
第二章 :巨型艾美球虫上海株与南通株间差异表达基因的筛选与分析第55-78页
 1 材料与方法第55-65页
   ·主要试剂第55-56页
   ·主要仪器第56页
   ·引物合成第56页
   ·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊cDNA的合成第56-57页
   ·Dot-blot筛选差异表达克隆第57-61页
   ·差异表达cDNA片段测序与序列分析第61页
   ·差异表达克隆的RT-PCR验证第61-63页
   ·差异表达基因的Real Time PCR验证第63-65页
 2 结果与分析第65-75页
   ·Dot-blot筛选差异表达基因第65页
   ·差异表达基因的生物信息学分析第65-71页
   ·差异表达基因的RT-PCR验证第71页
   ·差异表达基因的Real Time PCR验证第71-75页
 3 讨论第75-77页
 参考文献第77-78页
全文小结第78-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80-81页

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