中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
目录 | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-11页 |
文献综述 | 第11-33页 |
一、cDNA文库及其在鸡球虫研究中的应用 | 第11-14页 |
二、抑制消减杂交技术及其应用 | 第14-22页 |
三、cDNA文库阳性克隆中差异表达基因的筛选方法 | 第22-27页 |
参考文献 | 第27-33页 |
第一章 巨型艾美球虫上海株与南通株间消减cDNA文库的构建 | 第33-55页 |
1 材料与方法 | 第33-47页 |
·实验动物 | 第33-34页 |
·实验虫株与菌株 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊的收集与纯化 | 第34-35页 |
·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊总RNA的提取与检测 | 第35-37页 |
·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊mRNA的提纯与纯度检测 | 第37-38页 |
·抑制消减杂交 | 第38-45页 |
·E.maxima未孢子化卵囊阶段消减cDNA文库的构建 | 第45-47页 |
·消减cDNA文库重组率及插入片段长度分析 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-52页 |
·E.maxima未孢子化卵囊的收集与纯化 | 第47-48页 |
·E.maxima未孢子化卵囊总RNA的提取 | 第48页 |
·接头连接效率分析 | 第48-50页 |
·抑制消减杂交第二轮PCR产物 | 第50-51页 |
·消减cDNA质粒文库重组率与插入片段长度分析 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-55页 |
第二章 :巨型艾美球虫上海株与南通株间差异表达基因的筛选与分析 | 第55-78页 |
1 材料与方法 | 第55-65页 |
·主要试剂 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·引物合成 | 第56页 |
·E.maxima SH株和NT株未孢子化卵囊cDNA的合成 | 第56-57页 |
·Dot-blot筛选差异表达克隆 | 第57-61页 |
·差异表达cDNA片段测序与序列分析 | 第61页 |
·差异表达克隆的RT-PCR验证 | 第61-63页 |
·差异表达基因的Real Time PCR验证 | 第63-65页 |
2 结果与分析 | 第65-75页 |
·Dot-blot筛选差异表达基因 | 第65页 |
·差异表达基因的生物信息学分析 | 第65-71页 |
·差异表达基因的RT-PCR验证 | 第71页 |
·差异表达基因的Real Time PCR验证 | 第71-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-78页 |
全文小结 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第80-81页 |