| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略词 | 第9-13页 |
| 1 绪论 | 第13-20页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·研究背景 | 第13-16页 |
| ·真核生物启动子的研究进展 | 第13-14页 |
| ·绿僵菌致病相关基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·昆虫病原真菌功能基因启动子的研究进展 | 第15-16页 |
| ·课题立题依据与研究目的 | 第16-18页 |
| ·立题依据 | 第16-18页 |
| ·本课题研究目的 | 第18页 |
| ·本课题研究内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19页 |
| ·本课题的创新之处 | 第19-20页 |
| 2 绿僵菌 PMagpd 的结构与功能研究 | 第20-42页 |
| ·主要材料 | 第20-24页 |
| ·供试菌株 | 第20页 |
| ·主要培养基 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要溶液的配置 | 第21-23页 |
| ·主要设备 | 第23-24页 |
| ·主要方法 | 第24-35页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第24页 |
| ·农杆菌感受态的制备、转化 | 第24-25页 |
| ·农杆菌介导的绿僵菌的转化 | 第25页 |
| ·PMagpd 序列的获取及生物信息学的分析 | 第25页 |
| ·PMagpd 缺失突变载体的构建 | 第25-28页 |
| ·少量真菌基因组的快速提取 | 第28页 |
| ·PMagpd 的 5’缺失转化子的筛选 | 第28-29页 |
| ·大量真菌基因组的提取 | 第29页 |
| ·Southern blot 验证转化子及其 PMagpd 插入拷贝数 | 第29-31页 |
| ·荧光定量分析检测 PMagpd 转化子的 GUS 酶活 | 第31-33页 |
| ·绿僵菌菌丝 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·qRT-PCR 检测 PMagpd 缺失突变菌株的 GUS 表达量 | 第34-35页 |
| ·数据统计分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·PMagpd 序列分析结果 | 第35-37页 |
| ·转化子分析结果 | 第37-38页 |
| ·PMagpd 的缺失分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 3 绿僵菌 PMagas1 结构与功能分析 | 第42-51页 |
| ·主要材料 | 第42页 |
| ·供试菌株 | 第42页 |
| ·主要培养基配置 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要溶液配置 | 第42页 |
| ·主要设备 | 第42页 |
| ·主要方法 | 第42-45页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第42页 |
| ·农杆菌感受态制备、转化 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的绿僵菌的转化 | 第42页 |
| ·PMagas1 序列的获取及生物信息学的分析 | 第42-43页 |
| ·PMagas1 缺失突变载体的构建 | 第43-44页 |
| ·附着胞的培养及荧光观察 | 第44-45页 |
| ·少量真菌基因组的快速提取 | 第45页 |
| ·PMagas1 的 5’缺失转化子的筛选 | 第45页 |
| ·大量真菌基因组的提取 | 第45页 |
| ·Southern blot 检验转化子 PMagas1 的拷贝数 | 第45页 |
| ·PMagas1 缺失突变菌株附着胞的 RNA 的提取 | 第45页 |
| ·荧光定量 PCR 技术检测 PMagas1 缺失突变的活性 | 第45页 |
| ·数据分析统计 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-50页 |
| ·PMagas1 序列分析结果 | 第45-47页 |
| ·PMagas1 缺失突变转化子验证结果 | 第47-48页 |
| ·PMagas1 时期特异性分析结果 | 第48-49页 |
| ·PMagas1 缺失突变分析结果 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 4 主要结论与后续工作建议 | 第51-52页 |
| ·主要结论 | 第51页 |
| ·PMagpd 主要研究结论 | 第51页 |
| ·PMagas1 主要研究结论 | 第51页 |
| ·后续工作 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| A. 序列 | 第58-59页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第59页 |
