| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-28页 |
| ·白菜和十字花科黑腐病菌简介 | 第13-14页 |
| ·白菜简介 | 第13页 |
| ·十字花科黑腐病菌简介 | 第13-14页 |
| ·植物病原菌与植物的相互作用机理 | 第14-17页 |
| ·植物免疫 | 第14-15页 |
| ·植物PTI途径 | 第15页 |
| ·植物ETI途径 | 第15-16页 |
| ·植物病原菌与植物的易感性 | 第16-17页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第17-21页 |
| ·与Ⅲ型分泌系统相关的基因及蛋白 | 第17-19页 |
| ·hrp基因和hrc基因 | 第17-18页 |
| ·avr基因 | 第18页 |
| ·效应物基因和R基因 | 第18-19页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第19-20页 |
| ·Ⅲ型效应物 | 第20-21页 |
| ·蛋白质与蛋白质之间相互作用的研究方法 | 第21-27页 |
| ·细菌双杂交技术 | 第21-22页 |
| ·细菌双杂交的原理及分类 | 第21-22页 |
| ·细菌双杂交的特点 | 第22页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第22-23页 |
| ·GST pull-down实验 | 第23-24页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP) | 第24页 |
| ·酵母双杂交系 | 第24-27页 |
| ·酵母双杂交系统的基本原理 | 第25-26页 |
| ·酵母双杂交系统的应用 | 第26页 |
| ·酵母双杂交系统的特点 | 第26-27页 |
| ·研究内容、目的和意义 | 第27-28页 |
| ·研究内容 | 第27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-50页 |
| ·质粒及菌株 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·培养基和试剂 | 第30-31页 |
| ·抗生素使用浓度 | 第31页 |
| ·诱饵载体的构建 | 第31-38页 |
| ·Xcc 8004总DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·外源片段扩增 | 第32页 |
| ·pGBKT7诱饵质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·化学法转化到大肠杆菌DH5α | 第33-34页 |
| ·化学感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·化学法转化 | 第33-34页 |
| ·阳性转化子的验证 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌菌落PCR | 第34-35页 |
| ·双酶切验证 | 第35页 |
| ·诱饵质粒的测序 | 第35页 |
| ·诱饵载体转化入酵母Y187菌株 | 第35-37页 |
| ·酵母感受态的制备 | 第35-36页 |
| ·酵母感受态的转化 | 第36-37页 |
| ·酵母菌落PCR验证 | 第37页 |
| ·自激活检测 | 第37页 |
| ·毒性检测 | 第37-38页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第38-46页 |
| ·pGADT7-Rec SmaI单酶切质粒的大量制备 | 第38-39页 |
| ·Xcc 8004侵染宿主白菜叶片总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·Xcc 8004侵染宿主白菜叶片 | 第39页 |
| ·侵染叶片总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第40-41页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第41-42页 |
| ·第二链的扩增 | 第42-43页 |
| ·第二链的纯化 | 第43页 |
| ·cDNA文库的转化 | 第43-44页 |
| ·cDNA文库的收获 | 第44-45页 |
| ·cDNA文库的质量检测 | 第45-46页 |
| ·cDNA文库转化效率 | 第45页 |
| ·cDNA文库重组效率 | 第45-46页 |
| ·cDNA文库滴度 | 第46页 |
| ·酵母双杂交 | 第46-47页 |
| ·诱饵质粒菌株Y187的制备 | 第46页 |
| ·酵母双杂交 | 第46-47页 |
| ·候选基因的筛选鉴定 | 第47-50页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第47页 |
| ·酵母AH109菌落PCR方法进行初筛 | 第47页 |
| ·酶切验证 | 第47页 |
| ·测序 | 第47-48页 |
| ·诱饵质粒和相应的文库质粒进行一对一的回转验证 | 第48页 |
| ·阳性克隆子的β-半乳糖苷酶活的测定 | 第48-49页 |
| ·阳性克隆子序列的分析 | 第49-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-72页 |
| ·pGBKT7融合质粒的构建 | 第50-51页 |
| ·外源片段扩增 | 第50页 |
| ·pGBKT7融合质粒 | 第50-51页 |
| ·pGBKT7融合质粒测序 | 第51页 |
| ·诱饵载体转化入酵母Y187菌株的自激活检测 | 第51-52页 |
| ·诱饵载体转化入酵母Y187菌株的毒性检测 | 第52-53页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第53-55页 |
| ·侵染叶片总RNA的提取及mRNA的分离纯化 | 第53-54页 |
| ·第一链cDNA的合成和第二链的扩增 | 第54-55页 |
| ·Xcc 8004侵染宿主白菜cDNA文库的质量检测 | 第55-57页 |
| ·候选基因的筛选鉴定 | 第57-61页 |
| ·酵母双杂交结果 | 第57页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第57-58页 |
| ·酵母菌落PCR方法初步排除重复的克隆子 | 第58-60页 |
| ·HindⅢ限制性内切酶酶切文库质粒进行进一步鉴定 | 第60-61页 |
| ·插入片段测序 | 第61-63页 |
| ·诱饵质粒与相应文库质粒一对一的回转验证 | 第63-66页 |
| ·阳性克隆子的β-半乳糖苷酶活的测定 | 第66-67页 |
| ·靶标序列的生物学分析 | 第67-72页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第72-77页 |
| ·研究内容总结 | 第72-73页 |
| ·候选靶蛋白和Ⅲ型效应物相互作用的分析 | 第73-75页 |
| ·关于候选蛋白 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 附录 | 第88-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
