| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 图表目录 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-22页 |
| ·恶性肿瘤并发血栓 | 第15-18页 |
| ·恶性肿瘤并发血栓形成的机制 | 第15-17页 |
| ·血栓是恶性肿瘤的征兆 | 第17页 |
| ·肿瘤并发血栓形成的治疗 | 第17-18页 |
| ·金黄色葡萄球菌肠毒素 C2 超抗原 | 第18-20页 |
| ·超抗原 | 第18页 |
| ·金黄色葡萄球菌肠毒素 | 第18-19页 |
| ·金黄色葡萄球菌肠毒素 C2 | 第19页 |
| ·SEC2 的抗肿瘤机制 | 第19页 |
| ·SEC2 缺失突变体 | 第19-20页 |
| ·金黄色葡萄球菌激酶 | 第20-21页 |
| ·Sak 的溶栓作用机制 | 第20页 |
| ·Sak 的溶栓优势 | 第20-21页 |
| ·Sak 缺失突变体 | 第21页 |
| ·目的和意义 | 第21-22页 |
| 第一章 嵌合蛋白缺失突变体构建 | 第22-43页 |
| ·实验目的 | 第22页 |
| ·方案设计与分析 | 第22-23页 |
| ·实验材料与试剂 | 第23-29页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第23页 |
| ·分子生物学常用酶 | 第23-24页 |
| ·常规分子生物学试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| ·常用试剂盒 | 第26页 |
| ·常用溶液和试剂 | 第26-28页 |
| ·细菌培养用液体培养基和固体培养基 | 第28页 |
| ·DNA、蛋白质分子量标准 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·细菌的培养与保存 | 第29页 |
| ·质粒小量提取 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·目的片段的 PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·酶切反应 | 第31页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第31-32页 |
| ·转化感受态细胞 | 第32页 |
| ·目的蛋白诱导表达 | 第32页 |
| ·细胞裂解液的获得超声破碎菌体方法 | 第32-33页 |
| ·Ni-NTA 亲和层析柱的预处理 | 第33页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·Ni-NTA 琼脂糖的再生 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE | 第34页 |
| ·实验结果 | 第34-41页 |
| ·嵌合蛋白ΔSEC2-ΔSak 的构建 | 第34-38页 |
| ·嵌合蛋白ΔSak-ΔSEC2 的构建 | 第38-41页 |
| ·分析与讨论 | 第41-43页 |
| 第二章 嵌合蛋白 WESTERN BLOT 鉴定 | 第43-51页 |
| ·实验目的 | 第43页 |
| ·实验材料与试剂 | 第43-45页 |
| ·常用试剂 | 第43页 |
| ·常用仪器 | 第43-44页 |
| ·常用试剂配制 | 第44-45页 |
| ·基本实验方法 | 第45-47页 |
| ·抗血清的制备 | 第45-46页 |
| ·蛋白印迹（western blot）检测 | 第46页 |
| ·间接 ELISA 检测抗体效价 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-49页 |
| ·western blot 检测抗体 | 第47-48页 |
| ·western blot 检测抗体专一性 | 第48-49页 |
| ·间接 ELISA 检测抗体效价 | 第49页 |
| ·western blot 鉴定嵌合蛋白 | 第49页 |
| ·分析与讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 嵌合蛋白体外 PBMC 增殖和抑瘤活性研究 | 第51-59页 |
| ·实验目的 | 第51页 |
| ·方案设计与分析 | 第51页 |
| ·实验材料与试剂 | 第51-54页 |
| ·细胞系 | 第51-52页 |
| ·细胞培养基 | 第52页 |
| ·细胞生物学常用生化试剂 | 第52页 |
| ·仪器和设备 | 第52-53页 |
| ·常用溶液及缓冲液 | 第53-54页 |
| ·基本实验方法 | 第54-57页 |
| ·鼠脾淋巴细胞增殖试验 | 第54-55页 |
| ·823 细胞的传代和培养 | 第55页 |
| ·体外抑瘤试验 | 第55-57页 |
| ·实验结果 | 第57-58页 |
| ·体外刺激鼠脾淋巴细胞增殖作用 | 第57页 |
| ·体外抑瘤活性 | 第57-58页 |
| ·分析与讨论 | 第58-59页 |
| 第四章 嵌合蛋白体外溶栓活性研究 | 第59-64页 |
| ·实验目的 | 第59页 |
| ·方案设计与分析 | 第59页 |
| ·实验材料与试剂 | 第59-60页 |
| ·实验试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器和设备 | 第60页 |
| ·常用溶液及缓冲液 | 第60页 |
| ·基本实验方法 | 第60-61页 |
| ·纤维平板的制备 | 第60页 |
| ·尿激酶标准曲线制作 | 第60页 |
| ·嵌合蛋白溶栓活力测定 | 第60-61页 |
| ·实验结果 | 第61-63页 |
| ·尿激酶标准曲线制作 | 第61-62页 |
| ·嵌合蛋白溶栓活力测定 | 第62-63页 |
| ·分析与讨论 | 第63-64页 |
| 结论与展望 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 附录 | 第72-77页 |
| 攻读学位期间发表论文以及参加科研情况 | 第77-78页 |