| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-21页 |
| 第一章 盐碱胁迫下青海湖裸鲤鳃基因表达差异 | 第21-37页 |
| ·材料与方法 | 第21-27页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·盐碱混合胁迫实验设计 | 第22页 |
| ·样品采集和处理 | 第22页 |
| ·总RNA提取 | 第22页 |
| ·SMART反转录 | 第22-23页 |
| ·酶切实验 | 第23页 |
| ·接头连接及连接效率分析 | 第23-24页 |
| ·消减杂交PCR | 第24-25页 |
| ·消减cDNA文库的构建 | 第25-26页 |
| ·序列分析和注释 | 第26页 |
| ·差异表达基因的定量PCR验证 | 第26-27页 |
| ·统计分析 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-34页 |
| ·总RNA提取及反转录 | 第27-28页 |
| ·双链cDNA的合成与酶切 | 第28页 |
| ·接头连接效率分析 | 第28-30页 |
| ·消减杂交效率分析 | 第30-31页 |
| ·差异片段阳性克隆的筛选 | 第31页 |
| ·差异表达基因的生物信息学分析 | 第31-33页 |
| ·差异表达基因的定量PCR验证 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·催化活性相关基因 | 第35页 |
| ·免疫应答及应激反应相关基因 | 第35-36页 |
| ·信号转导相关基因 | 第36-37页 |
| 第二章 青海湖裸鲤Na~+,K~+-ATP酶β1b亚基的克隆及分析 | 第37-51页 |
| ·材料与方法 | 第37-42页 |
| ·实验用鱼 | 第37-38页 |
| ·实验配水 | 第38页 |
| ·急性胁迫实验 | 第38-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第39页 |
| ·反转录 | 第39页 |
| ·RACEcDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b部分序列的获得 | 第40页 |
| ·5’-和3’-NKA-β1bcDNA的扩增 | 第40-41页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆和测序 | 第41页 |
| ·序列生物信息分析和蛋白质结构预测 | 第41页 |
| ·多序列比对和进化分析 | 第41页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b的组织分布 | 第41-42页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b的表达定量 | 第42页 |
| ·数据分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-48页 |
| ·总RNA及RACE产物的鉴定 | 第42-43页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b全长序列 | 第43-45页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b的进化分析 | 第45-46页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b的组织分布 | 第46页 |
| ·盐碱胁迫下青海湖裸鲤NKA-β1b的表达变化 | 第46-48页 |
| ·高碱胁迫下青海湖裸鲤NKA-β1b的表达变化 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·青海湖裸鲤NKA-β1b序列分析 | 第48-49页 |
| ·盐碱胁迫下青海湖裸鲤NKA-β1b的表达变化 | 第49-51页 |
| 第三章 青海湖裸鲤CAⅡ全长cDNA的克隆及分析 | 第51-60页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·实验用鱼 | 第51-52页 |
| ·急性胁迫实验和实验用水 | 第52页 |
| ·青海湖裸鲤总RNA的提取和反转录 | 第52页 |
| ·RACEcDNA第一链的合成 | 第52页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ部分序列的获得 | 第52页 |
| ·5’-和3’-CAⅡcDNA的扩增及克隆 | 第52-53页 |
| ·序列分析和结构预测 | 第53页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ的组织分布 | 第53页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ的表达分析 | 第53页 |
| ·数据分析 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ全长序列 | 第54-55页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ的同源性分析 | 第55-57页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ的组织分布 | 第57页 |
| ·盐碱胁迫下青海湖裸鲤CAⅡ的表达变化 | 第57页 |
| ·高碱胁迫下青海湖裸鲤CAⅡ的表达变化 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ的序列分析 | 第58页 |
| ·青海湖裸鲤CAⅡ的组织分布 | 第58-59页 |
| ·盐碱胁迫下青海湖裸鲤CAⅡ的表达变化 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 硕士期间完成论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |