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肠道缺血再灌注损伤时淋巴液细胞培养及多不饱和脂肪酸干预的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要(ABSTRACT)第6-8页
缩略词表(ABBREVIATION)第8-9页
前言第9-13页
实验材料第13-18页
 一. 主要实验试剂第13-15页
  (一) 内毒素试剂盒第13页
  (二) 细胞因子测定试剂盒第13-14页
  (三) 淋巴液处理试剂第14页
  (四) WESTERN BLOT检测试剂第14页
  (五) RT-PCR检测试剂第14-15页
  (六) 细胞培养所用试剂第15页
 二. 实验耗材第15页
  (一) 一般实验耗材第15页
  (二) 细胞培养专用耗材第15页
 三. 动物实验耗材和手术器械第15-16页
  (一) 实验耗材第15-16页
  (二) 手术器械第16页
 四. 主要仪器设备第16-18页
  (一) 一般仪器第16-17页
  (二) WESTERN BLOT中用到的仪器第17页
  (三) 细胞培养所用到的仪器第17-18页
研究内容和研究方法第18-38页
 第一部分:大鼠肠道缺血再灌注损伤时血和淋巴液的成分测定第18-25页
  一. 研究设计第18页
  二. 操作步骤第18-20页
   (一) 动物分组第18页
   (二) 术前准备第18-19页
   (三) 肠道缺血再灌注(I/R)术第19页
   (四) 肠道缺血再灌注加淋巴液引流(I/R+淋巴液引流)术第19-20页
   (五) 取材第20页
  三. 观察项目及检测方法第20-25页
   (一) 体重第20页
   (二) 血和淋巴液中内毒素测定第20-22页
   (三) 血和淋巴液中细胞因子的测定(ELISA法)第22-24页
   (四) 血脂测定第24-25页
 第二部分:淋巴液不同处理后刺激单核巨睡细胞培养及营养干预第25-37页
  一. 研究设计第25页
  二. 操作步骤第25-30页
   (一) 实验前准备第25-26页
   (二) 培养基的配置第26页
   (三) 内毒素去除方法第26-27页
   (四) 去蛋白方法第27页
   (五) 细胞冻存用培养基配置方法第27-28页
   (六) 巨噬细胞复苏、培养和传代第28页
   (七) 单核巨噬细胞刺激实验及营养干预研究第28-29页
   (八) 冻存细胞第29-30页
  三.观察项目及检测方法第30-37页
   (一) 细胞及培养上清中细胞因子等的测定第30页
   (二) TLR4、HMGB1和NF-κB蛋白表达--WESTERN BLOT第30-33页
   (三) TLR4、HMGB1、NF-κB、MCP-1、MIP-2基因表达--RT-PCR第33-37页
 第三部分 统计学处理第37-38页
研究结果第38-45页
 (一) 肠道I/R和淋巴液引流时血和淋巴液中内毒素水平第38页
 (二)肠道I/R和淋巴液引流后血和淋巴液中TLR4、HMGB-丨、MCP-1、MIP-2水平第38页
 (三)肠道I/R和淋巴液引流后血清和淋巴液中血脂水平第38-39页
 (四)肠道淋巴液引流方法的成功率第39页
 (五)蛋白酶K水解蛋白质第39页
 (六)内毒素去除柱去除淋巴液中内毒素第39-40页
 (七)不同处理的淋巴液剌激单核巨唆细胞后炎症因子水平第40-42页
 (八)不同处理的淋巴液刺激单核巨睡细胞后的蛋白表达第42-43页
 (九)不同处理的淋巴液刺激单核巨唾细胞后基因表达水平第43-45页
讨论第45-51页
 一. 建立大鼠肠道缺血再灌注损伤模型和淋巴液的引流方法第46页
 二. 肠道缺血再灌注后血和淋巴液中活性物质的变化第46-48页
 三. 肠系膜淋巴液处理方法的确立及探讨第48-49页
 四. 淋巴液刺激单核巨噬细胞及Ω-3PUFAs干预第49-51页
结论第51-52页
参考文献第52-57页
非论文综述第57-66页
 参考文献第63-66页
硕士期间发表论文及著作第66-67页
致谢第67-69页

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