| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-27页 |
| ·低温和盐胁迫对植物的伤害 | 第13页 |
| ·植物对低温和盐胁迫的应答 | 第13-16页 |
| ·植物细胞膜系统组分的改变 | 第14页 |
| ·活性氧的产生和清除 | 第14-15页 |
| ·渗透调节 | 第15页 |
| ·胁迫相关基因的表达 | 第15-16页 |
| ·植物 MAPK 级联途径 | 第16-18页 |
| ·植物中的 MAPKKK | 第16-17页 |
| ·植物中的 MAPKK | 第17-18页 |
| ·植物中的 MAPK | 第18页 |
| ·植物 MAPK 级联途径的功能 | 第18-25页 |
| ·MAPK 级联途径参与生物胁迫的调控 | 第18-19页 |
| ·MAPK 级联途径在非生物胁迫中的功能 | 第19-21页 |
| ·MAPK 级联途径在植物盐胁迫中的功能 | 第19-20页 |
| ·MAPK 级联途径在植物低温胁迫中的功能 | 第20-21页 |
| ·MAPK 级联途径在植物干旱胁迫中的功能 | 第21页 |
| ·MAPK 级联途径在植物机械伤害中的功能 | 第21页 |
| ·MAPK 级联途径与 ROS | 第21-22页 |
| ·MAPK 级联途径与植物激素信号转导 | 第22-24页 |
| ·MAPK 级联途径与生长素信号转导 | 第22页 |
| ·MAPK 级联途径与乙烯信号转导 | 第22-23页 |
| ·MAPK 级联途径与 A B A 信号转导 | 第23-24页 |
| ·MAPK 级联途径与 Ca~(2+) | 第24-25页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
| 2 材料和方法 | 第27-46页 |
| ·实验材料 | 第27-31页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27-28页 |
| ·PCR 引物 | 第28-29页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-46页 |
| ·植物材料总 RNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第32页 |
| ·ZmMPK4 和 ZmMPK4-AF 基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 | 第33页 |
| ·连接反应 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第34页 |
| ·D N A 序列测定 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌中质粒 DNA 的提取 | 第35页 |
| ·植物基因组 DNA 提取 | 第35-36页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第36页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第36-39页 |
| ·蛋白质提取及含量测定 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE | 第36-37页 |
| ·转膜 | 第37-38页 |
| ·Western blot | 第38-39页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位 | 第39-40页 |
| ·pBI121-ZmMPK4-GFP 表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·pBI121-ZmMPK4-GFP 重组蛋白亚细胞定位 | 第40页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第40-42页 |
| ·表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草植株鉴定 | 第43页 |
| ·基因组水平的鉴定 | 第43页 |
| ·转录水平的鉴定 | 第43页 |
| ·蛋白水平的鉴定 | 第43页 |
| ·转基因植株生理指标测定 | 第43-45页 |
| ·烟草种子萌发实验及幼苗生长实验 | 第43-44页 |
| ·H_2O_2含量测定 | 第44页 |
| ·DAB 和 NBT 染色 | 第44页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第44页 |
| ·游离脯氨酸含量测定 | 第44-45页 |
| ·可溶性糖含量测定 | 第45页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第45页 |
| ·统计分析 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-67页 |
| ·玉米促分裂原活化蛋白激酶 ZmMPK4 基因的分离 | 第46页 |
| ·ZmMPK4 基因的序列分析 | 第46-49页 |
| ·ZmMPK4 全长 cDNA 分析 | 第46页 |
| ·ZmMPK4 编码蛋白质序列分析 | 第46-47页 |
| ·ZmMPK4 序列系统发生分析 | 第47-49页 |
| ·ZmMPK4 的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| ·ZmMPK4 在玉米中的表达分析 | 第50-53页 |
| ·ZmMPK4 在玉米不同部位的表达分析 | 第50页 |
| ·ZmMPK4 在逆境胁迫和不同信号分子下的表达分析 | 第50-52页 |
| ·H_2O_2影响 NaCl 、4C 和 ABA 诱导的 ZmMPK4 的表达 | 第52页 |
| ·Ca~(2+) 参与 NaCl、4C 、ABA 和 H_2O_2诱导的 ZmMPK4 的表达 | 第52-53页 |
| ·ZmMPK4 基因在烟草中的转化 | 第53-55页 |
| ·转基因表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第54-55页 |
| ·过表达 ZmMPK4 提高转基因烟草的抗低温能力 | 第55-56页 |
| ·过表达 ZmMPK4 -AF 未提高转基因烟草抗低温能力 | 第56-59页 |
| ·过表达 ZmMPK4 增强转基因烟草对盐胁迫的抗性 | 第59-61页 |
| ·过表达 ZmMPK4 增强转基因烟草的抗氧化能力 | 第61-65页 |
| ·ZmMPK4 调控 ROS 的积累 | 第61-62页 |
| ·过表达 ZmMPK4 提高转基因烟草抗氧化能力 | 第62-64页 |
| ·ZmMPK4 调控抗氧化酶的活性 | 第64-65页 |
| ·过表达 ZmMPK4 增加转基因烟草游离脯氨酸和可溶性糖的含量 | 第65-66页 |
| ·过表达 ZmMPK4 增强 ROS 相关基因和胁迫响应基因的表达 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第91页 |
