| 中文摘要 | 第1-15页 |
| 英文摘要 | 第15-23页 |
| 第一部分 文献综述 | 第23-61页 |
| 1．1 苹果属植物种质资源及其研究现状 | 第23-37页 |
| 1．1．1 调查、收集和保存 | 第23-25页 |
| 1．1．1．1 调查和收集 | 第23-24页 |
| 1．1．1．2 保存 | 第24-25页 |
| 1．1．2 种类、数量和分布 | 第25页 |
| 1．1．3 起源与演化 | 第25-31页 |
| 1．1．3．1 属的起源与组系间演化 | 第25-29页 |
| 1．1．3．2 种间演化关系与栽培苹果的起源 | 第29-31页 |
| 1．1．4 孢粉学研究 | 第31页 |
| 1．1．5 细胞学研究 | 第31-32页 |
| 1．1．6 同工酶研究 | 第32页 |
| 1．1．7 形态与分类 | 第32-33页 |
| 1．1．8 抗逆境生物学特性 | 第33-35页 |
| 1．1．8．1 耐盐性 | 第33-34页 |
| 1．1．8．2 耐旱和耐热性 | 第34页 |
| 1．1．8．3 耐涝性 | 第34页 |
| 1．1．8．4 抗寒性 | 第34-35页 |
| 1．1．8．5 腐烂病和潜隐病毒 | 第35页 |
| 1．1．9 生物学特性 | 第35-37页 |
| 1．1．9．1 无融合生殖特性 | 第35-36页 |
| 1．1．9．2 杂交亲和性 | 第36页 |
| 1．1．9．3 矮化性 | 第36-37页 |
| 1．2 苹果属植物珍贵基因资源小金海棠研究 | 第37-42页 |
| 1．2．1 小金海棠的植物学特征与分类地位 | 第37-38页 |
| 1．2．2 小金海棠的地理分布、生态特性和区系地理特征 | 第38页 |
| 1．2．3 小金海棠的抗逆境特性 | 第38-40页 |
| 1．2．3．1 小金海棠对铁的吸收及其耐盐性 | 第38-39页 |
| 1．2．3．2 耐旱和耐热性 | 第39页 |
| 1．2．3．3 耐涝性 | 第39页 |
| 1．2．3．4 耐寒性 | 第39-40页 |
| 1．2．3．5 小金海棠对潜隐病毒的抗性 | 第40页 |
| 1．2．4 小金海棠的生物学和园艺特性 | 第40-41页 |
| 1．2．4．1 无融合生殖能力 | 第40页 |
| 1．2．4．2 嫁接亲和性 | 第40-41页 |
| 1．2．4．3 嫁接树的丰产性 | 第41页 |
| 1．2．5 小金海棠及其近缘种类间的演化关系 | 第41-42页 |
| 1．3 现代分子生物学技术在苹果资源与利用研究中的应用 | 第42-49页 |
| 1．3．1 分子标记技术在苹果资源与育种研究中的应用 | 第42-46页 |
| 1．3．1．1 分子标记的概念和种类 | 第42-43页 |
| 1．3．1．2 分子标记在苹果资源研究中的应用 | 第43-45页 |
| 1．3．1．3 分子标记在苹果育种研究中的应用 | 第45-46页 |
| 1．3．1．4 分子标记与苹果性状的发育和遗传 | 第46页 |
| 1．3．2 常用的基因克隆技术及其苹果基因克隆现状 | 第46-48页 |
| 1．3．2．1 基因克隆主要技术简介 | 第46-47页 |
| 1．3．2．2 苹果基因克隆现状 | 第47-48页 |
| 1．3．3 苹果转基因研究 | 第48-49页 |
| 1．4 植物铁结合蛋白及其基因的研究现状 | 第49-61页 |
| 1．4．1 铁结合蛋白及其基因研究的意义 | 第49-50页 |
| 1．4．2 铁结合蛋白的结构和功能 | 第50-54页 |
| 1．4．2．1 铁结合蛋白结构 | 第50-51页 |
| 1．4．2．2 动植物铁结合蛋白结构上的异同及其影响因素 | 第51-52页 |
| 1．4．2．3 铁结合蛋白的功能 | 第52-53页 |
| 1．4．2．4 铁结合蛋白对铁的吸收和释放及其影响因子 | 第53-54页 |
| 1．4．3 植物铁结合蛋白基因的结构 | 第54-55页 |
| 1．4．4 铁结合蛋白基因的表达和调控 | 第55-59页 |
| 1．4．4．1 动植物铁结合蛋白基因表达的差异 | 第55-56页 |
| 1．4．4．2 铁与铁结合蛋白基因的表达和调控 | 第56-58页 |
| 1．4．4．3 铁结合蛋白基因表达的调控因子 | 第58-59页 |
| 1．4．4．4 影响铁结合蛋白基因表达的非铁因子 | 第59页 |
| 1．4．5 铁结合蛋白基因的体外重组与转基因研究 | 第59-61页 |
| 第二部分 引言 | 第61-64页 |
| 2．1 论文立题的原由和基本的研究思路 | 第61-62页 |
| 2．2 论文研究的目的、意义 | 第62-63页 |
| 2．2．1 研究小金海棠遗传多样性的目的和意义 | 第62页 |
| 2．2．2 克隆小金海棠铁结合蛋白基因的目的和意义 | 第62-63页 |
| 2．3 论文设计研究的主要内容 | 第63-64页 |
| 2．3．1 小金海棠种的遗传基础和遗传多样性 | 第63页 |
| 2．3．2 小金海棠铁结合蛋白基因的克隆、序列分析和结构预测 | 第63页 |
| 2．3．3 小金海棠铁结合蛋白基因表达载体构建和对小麦的遗传转化 | 第63-64页 |
| 第三部分 小金海棠种的遗传基础、群体遗传结构和遗传多样性研究 | 第64-74页 |
| 3．1 材料 | 第64-65页 |
| 3．1．1 群体的选择、取样和分析样本的准备 | 第64页 |
| 3．1．2 用于基因组DNA提取的叶片材料 | 第64-65页 |
| 3．1．3 主要试剂和药品 | 第65页 |
| 3．1．4 主要仪器和设备 | 第65页 |
| 3．2 方法 | 第65-67页 |
| 3．2．1 DNA的提取 | 第65-66页 |
| 3．2．2 DNA样品纯度、浓度检测及PCR反应 | 第66页 |
| 3．2．3 原始数据的统计 | 第66页 |
| 3．2．4 遗传关系的分析 | 第66-67页 |
| 3．2．5 群体的遗传多样性分析 | 第67页 |
| 3．2．6 AMOVA分析 | 第67页 |
| 3．3 结果与分析 | 第67-74页 |
| 3．3．1 用于RAID分析的基因组DNA模板的浓度和质量 | 第67-68页 |
| 3．3．2 RAPD带的多态性 | 第68-69页 |
| 3．3．3 小金海棠种内不同群体内和群体间的遗传关系 | 第69-71页 |
| 3．3．4 小金海棠两个世代间全部分析个体的遗传关系 | 第71-72页 |
| 3．3．5 小金海棠不同群体的遗传多样性 | 第72页 |
| 3．3．6 小金海棠群体遗传多样性及其在世代间的变化 | 第72-73页 |
| 3．3．7 小金海棠遗传变异的AMOVA分析 | 第73-74页 |
| 第四部分 小金海棠铁结合蛋白基因的克隆、序列分析和蛋白质特性、结构预测 | 第74-90页 |
| 4．1 材料 | 第74-75页 |
| 4．1．1 植物材料 | 第74页 |
| 4．1．2 克隆用载体和菌株 | 第74页 |
| 4．1．3 主要试剂和药品 | 第74-75页 |
| 4．1．4 主要仪器和设备 | 第75页 |
| 4．2 方法 | 第75-80页 |
| 4．2．1 基因组DNA的提取 | 第75页 |
| 4．2．2 特异引物的设计和PCR扩增 | 第75页 |
| 4．2．3 PCR产物的克隆 | 第75-79页 |
| 4．2．3．1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第75-76页 |
| 4．2．3．2 连接 | 第76页 |
| 4．2．3．3 连接产物的转化 | 第76-77页 |
| 4．2．3．4 阳性克隆细菌的增殖 | 第77页 |
| 4．2．3．5 质粒DNA的小量制备 | 第77-79页 |
| 4．2．3．6 重组质粒的PCR和酶切鉴定 | 第79页 |
| 4．2．4 重组质粒的测序 | 第79页 |
| 4．2．5 序列的同源性比较 | 第79-80页 |
| 4．2．6 基因的结构分析 | 第80页 |
| 4．2．7 蛋白质特性分析与结构预测 | 第80页 |
| 4．3 结果与分析 | 第80-90页 |
| 4．3．1 不同温度特异PCR的扩增结果与PCR产物的克隆 | 第80-81页 |
| 4．3．2 重组质粒的PCR和酶切鉴定 | 第81-82页 |
| 4．3．3 克隆片段的测序结果 | 第82-83页 |
| 4．3．4 小金海棠铁结合蛋白基因的氨基酸序列 | 第83-84页 |
| 4．3．5 小金海棠铁结合蛋白基因序列的同源性比较 | 第84-85页 |
| 4．3．6 小金海棠和大豆铁结合蛋白基因的结构比较 | 第85-86页 |
| 4．3．7 小金海棠铁结合蛋白的特性和结构预测 | 第86-90页 |
| 4．3．7．1 小金海棠铁结合蛋白的基本特性和氨基酸组成分析 | 第86-87页 |
| 4．3．7．2 小金海棠和大豆铁结合蛋白的滴定曲线 | 第87页 |
| 4．3．7．3 小金海棠铁和大豆结合蛋白信号肽可能的断裂点 | 第87-88页 |
| 4．3．7．4 点阵图 | 第88页 |
| 4．3．7．5 小金海棠铁结合蛋白的理化特性曲线 | 第88-89页 |
| 4．3．7．6 小金海棠铁结合蛋白中特征位点查找 | 第89页 |
| 4．3．7．7 小金海棠铁结合蛋白的二级结构预测 | 第89-90页 |
| 第五部分 小金海棠铁结合蛋白基因表达载体构建和转化小麦的初步研究 | 第90-98页 |
| 5．1 材料 | 第90-91页 |
| 5．1．1 用于遗传转化的小麦材料 | 第90页 |
| 5．1．2 质粒和菌株 | 第90页 |
| 5．1．3 主要的酶和试剂 | 第90页 |
| 5．1．4 使用培养基的种类和成分 | 第90-91页 |
| 5．1．5 主要仪器和设备 | 第91页 |
| 5．2 方法 | 第91-95页 |
| 5．2．1 pBFKna植物表达载体的构建 | 第91-92页 |
| 5．2．2 遗传转化材料的选取、外植体的处理和愈伤组织的获得 | 第92-93页 |
| 5．2．3 基因枪轰击前的准备及轰击的步骤和方法 | 第93-95页 |
| 5．2．4 基因枪轰击后愈伤组织的恢复培养和转化子的筛选 | 第95页 |
| 5．3 结果与分析 | 第95-98页 |
| 5．3．1 目标基因和pBI121载体连接前的准备 | 第95-96页 |
| 5．3．2 pBFKna植物表达载体的酶切及PCR验证 | 第96页 |
| 5．3．3 用于基因枪轰击的PBFKna重组质粒DNA的制备 | 第96-97页 |
| 5．3．4 小麦转化子的初步筛选结果 | 第97-98页 |
| 第六部分 讨论 | 第98-104页 |
| 6．1 植物遗传多样性研究的意义 | 第98页 |
| 6．2 RAPD标记与植物遗传多样性研究 | 第98-99页 |
| 6．3 苹果属无融合生殖种的遗传多样性及其来源 | 第99-101页 |
| 6．4 小金海棠铁结合蛋白基因及其同源性分析 | 第101页 |
| 6．5 小金海棠铁结合蛋白基因的结构和功能问题 | 第101-102页 |
| 6．6 质粒DNA的提取 | 第102页 |
| 6．7 表达载体构建中的几个关键问题 | 第102-104页 |
| 第七部分 结论 | 第104-106页 |
| 7．1 小金海棠种的遗传基础 | 第104页 |
| 7．2 小金海棠群体的遗传结构 | 第104页 |
| 7．3 小金海棠遗传多样性的来源 | 第104-105页 |
| 7．4 小金海棠铁结合蛋白基因的克隆 | 第105页 |
| 7．5 小金海棠铁结合蛋白基因植物表达载体的构建 | 第105页 |
| 7．6 对小麦的遗传转化 | 第105页 |
| 7．7 本论文研究的创新点 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-118页 |
| 附录 | 第118-128页 |
| 缩写表 | 第128页 |
