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PtDRG01基因原核表达分析及遗传转化的初步研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
引言第11-13页
1 文献综述第13-25页
   ·杨树溃疡病抗病研究概况第13-15页
     ·发病规律第13页
     ·致病机理第13-14页
     ·抗病机制第14页
     ·溃疡病抗病育种研究第14-15页
   ·杨树烂皮病抗病研究概况第15-16页
     ·病原菌研究第15页
     ·致病原因第15-16页
     ·烂皮病的防治方法及抗病育种研究第16页
   ·杨树叶锈病抗病研究进展第16-22页
     ·杨树锈病病原菌研究第17-18页
     ·抗锈病基因克隆及分子标记研究第18-21页
     ·抗锈病育种研究第21-22页
   ·存在的问题与展望第22-23页
   ·本研究的方法与技术路线第23-25页
2 PtDRG01 基因的原核表达研究第25-36页
   ·材料与方法第25-30页
     ·基因与质粒第25页
     ·PtDRG01 基因原核表达载体的构建第25-28页
     ·筛选PtDRG01 基因诱导表达最佳条件第28-29页
     ·表达蛋白性质分析第29-30页
     ·SDS-PAGE 电泳检测第30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·PtDRG01 基因原核表达载体构建及重组子鉴定第30-31页
     ·PtDRG01 基因表达蛋白最佳诱导条件的筛选第31-32页
     ·融合蛋白表达特性分析第32-33页
   ·讨论第33-34页
     ·原核表达载体pGEX-KG 的选择第33-34页
     ·PtDRG01 基因的原核表达条件优化第34页
   ·小结第34-36页
3 PtDRG01 蛋白的生化功能分析第36-41页
   ·材料和方法第36-37页
     ·PtDRG01 蛋白的提取第36页
     ·PtDRG01 蛋白的纯化第36-37页
     ·PtDRG01 蛋白的生化特性分析第37页
   ·结果与分析第37-39页
     ·菌体破碎、蛋白提取及浓度测定第37-38页
     ·表达蛋白的纯化及鉴定第38页
     ·表达蛋白的特性分析第38-39页
   ·讨论第39-40页
     ·菌体破碎及浓度测定第39页
     ·转化外源基因对菌株影响第39-40页
     ·ATPase 酶活测定方法第40页
   ·小结第40-41页
4 PtDRG01 基因的遗传转化体系建立第41-47页
   ·材料与方法第41-42页
     ·植物材料第41页
     ·高效叶片再生体系的建立及选择压的确定第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·生长调节剂对叶片再生的影响第42-44页
     ·卡那霉素对叶片不定芽再生的影响及临界浓度确定第44-45页
   ·讨论第45页
     ·影响毛白杨叶片再生不定芽的因素第45页
     ·环境抗生素浓度对转化筛选的影响第45页
   ·小结第45-47页
5 基因枪介导遗传转化及对转基因无性系分子检测第47-57页
   ·材料与方法第47-52页
     ·重组子的准备第47-48页
     ·叶片受体材料的准备第48页
     ·基因枪转化流程第48-49页
     ·转基因无性系的筛选及扩繁第49页
     ·转基因无性系的分子检测第49-52页
   ·结果与分析第52-55页
     ·基因枪轰击参数对转化频率的影响第52页
     ·转化后的选择培养第52-53页
     ·转基因再生无性系的获得第53-54页
     ·分子检测结果第54-55页
   ·讨论第55-56页
     ·RNAi 技术第55页
     ·基因枪转化受体材料对转化率的影响第55-56页
     ·对转基因无性系的筛选第56页
     ·转基因分子检测手段的选择第56页
   ·小结第56-57页
6 结论与研究展望第57-59页
   ·结论第57页
     ·PtDRG01 基因原核表达研究第57页
     ·PtDRG01 蛋白功能研究第57页
     ·PtDRG01 基因遗传转化研究第57页
   ·研究建议与展望第57-59页
参考文献第59-66页
个人简介第66-67页
导师简介第67-68页
致谢第68页

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