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间充质干细胞向心肌细胞的分化以及工程化心肌组织的构建

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词索引表第13-14页
第1章 前 言第14-22页
   ·研究的背景第14-18页
     ·种子细胞的研究第14-15页
     ·生物支架材料的研究第15-17页
     ·心肌构建物的培养环境和生物反应器第17-18页
     ·工程化心肌组织的移植第18页
   ·课题的提出第18-19页
   ·研究的目的和意义第19页
   ·研究内容与研究方法第19-22页
第2章 大鼠脂肪组织源间充质干细胞的培养及诱导分化第22-28页
   ·引言第22页
   ·实验材料第22-23页
     ·动物来源第22页
     ·实验仪器、器材第22-23页
     ·主要试剂及配制方法第23页
   ·实验方法第23-24页
     ·细胞培养第23-24页
     ·细胞诱导分化第24页
     ·免疫组织化学鉴定第24页
   ·结果第24-26页
     ·ADMSCs 的形态观察第24-25页
     ·ADMSCs 的免疫组织化学鉴定第25-26页
   ·讨论第26-27页
   ·结论第27-28页
第3章 脂肪组织间充质干细胞的长期传代、冻存及诱导分化第28-35页
   ·引言第28页
   ·实验材料第28-29页
     ·细胞来源第28页
     ·实验仪器、器材第28-29页
     ·主要试剂及配制方法第29页
   ·实验方法第29-30页
     ·脂肪组织间充质干细胞的传代第29页
     ·脂肪组织间充质干细胞的冻存第29页
     ·细胞复苏第29页
     ·细胞诱导分化第29-30页
     ·组织化学染色第30页
   ·.结果第30-33页
     ·脂肪组织间充质干细胞的复苏第30-31页
     ·复苏后的脂肪组织间充质干细胞向心肌细胞分化第31页
     ·长期传代后的脂肪组织间充质干细胞向心肌细胞分化第31-33页
     ·脂肪组织间充质干细胞油红染色第33页
   ·讨论第33-34页
   ·结论第34-35页
第4章 脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化中心肌发育相关基因的表达第35-43页
   ·引言第35页
   ·实验材料第35-36页
     ·细胞来源第35页
     ·实验仪器、器材第35-36页
     ·主要试剂及配制方法第36页
   ·实验方法第36-37页
     ·细胞诱导分化第36页
     ·拉伸刺激第36页
     ·免疫组织化学染色第36-37页
   ·结果第37-41页
     ·心肌特异蛋白免疫组化染色第37-38页
     ·心肌发育相关基因免疫组化染色检测第38-39页
     ·拉伸刺激对ADMSCs 向心肌细胞分化的影响第39-41页
   ·讨论第41-42页
   ·结论第42-43页
第5章 新生大鼠心肌细胞的分离和体外培养第43-48页
   ·引言第43页
   ·实验材料第43-44页
     ·动物来源第43页
     ·实验仪器、器材第43页
     ·主要试剂及配制方法第43-44页
   ·实验方法第44-45页
     ·心肌细胞的培养第44页
     ·心肌细胞的生物学观察第44-45页
   ·结果第45-46页
     ·心肌细胞形态和搏动第45页
     ·心肌细胞成活率测定第45页
     ·心肌细胞的免疫组化染色第45-46页
   ·讨论第46-47页
   ·结论第47-48页
第6章 新生大鼠心室细胞高密度下的体外培养第48-56页
   ·引言第48页
   ·实验材料第48-49页
     ·动物来源第48页
     ·实验仪器、器材第48页
     ·主要试剂第48-49页
   ·实验方法第49-50页
     ·心室细胞的培养第49页
     ·心室细胞组织化学染色第49页
     ·心室细胞代谢物检测第49-50页
     ·心室细胞免疫组化染色第50页
   ·结果第50-54页
     ·心室细胞的培养第50-51页
     ·心室细胞组织化学染色第51页
     ·心室细胞代谢检测第51-53页
     ·心室细胞免疫组化染色第53-54页
   ·讨论第54-55页
   ·结论第55-56页
第7章 一种无支架心肌薄片的体外构建第56-63页
   ·引言第56页
   ·实验材料第56-57页
     ·动物来源第56页
     ·实验仪器、器材第56-57页
     ·主要试剂第57页
   ·实验方法第57-58页
     ·心肌细胞的培养第57页
     ·无支架心肌薄片的构建第57-58页
     ·心肌薄片的组织学检测第58页
     ·心肌薄片的透射电镜观察第58页
   ·结果第58-60页
     ·高密度心肌细胞的培养第58页
     ·心肌薄片的构建第58-59页
     ·心肌薄片的组织化学染色第59页
     ·心肌薄片的免疫组化染色第59-60页
     ·心肌薄片的透射电镜观察第60页
   ·讨论第60-62页
   ·结论第62-63页
第8章 以脱细胞小肠粘膜下层为支架体外构建工程化心肌组织第63-69页
   ·引言第63页
   ·实验材料第63-64页
     ·动物来源第63页
     ·实验仪器、器材第63-64页
     ·主要试剂第64页
   ·实验方法第64-65页
     ·SIS 的制备第64页
     ·SIS 的观察检测第64页
     ·工程化心肌组织的构建第64页
     ·工程化心肌组织的组织学检测第64-65页
   ·结果第65-67页
     ·SIS 的检测第65-66页
     ·工程化心肌组织的构建第66-67页
     ·工程化心肌组织的组织化学染色第67页
     ·工程化心肌组织的免疫组化染色第67页
   ·讨论第67-68页
   ·结论第68-69页
第9章 全文总结及展望第69-71页
   ·全文主要结论第69页
   ·本研究的创新点第69-70页
   ·后续工作的展望第70-71页
参考文献第71-78页
附录1 大鼠脂肪组织源间充质干细胞向成骨细胞诱导分化第78-79页
附录2 复苏和长期传代的大鼠脂肪组织源间充质干细胞向成骨细胞诱导分化第79-82页
附录3 基底拉伸应变加载装置简介第82-84页
作者简历第84-85页
致谢第85页

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