| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语 | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-37页 |
| ·链霉菌及其基础研究模式菌株天蓝色链霉菌A3(2)的概述 | 第12页 |
| ·链霉菌的形态分化发育 | 第12-31页 |
| ·应对生长环境的改变 | 第14-18页 |
| ·基质菌丝的程序性死亡 | 第18-20页 |
| ·次生代谢开始活跃 | 第20-24页 |
| ·转换菌丝的分支模式 | 第24-25页 |
| ·转换菌丝的细胞分裂模式 | 第25-27页 |
| ·天蓝色链霉菌A3(2)的一种信号级联系统 | 第27-31页 |
| ·纤维素合成酶及纤维素合成酶类似蛋白 | 第31-36页 |
| ·细菌中纤维素合成酶及纤维素合成的调控 | 第31-33页 |
| ·植物中纤维素合成酶及纤维素合成的调控 | 第33-36页 |
| ·本课题的工作基础、目的和意义 | 第36-37页 |
| 2 实验方法与材料 | 第37-55页 |
| ·实验材料 | 第37-40页 |
| ·实验菌株 | 第37-38页 |
| ·质粒与引物 | 第38-40页 |
| ·培养基与化学试剂 | 第40-44页 |
| ·实验方法 | 第44-55页 |
| ·链霉菌菌种培养及保存 | 第44页 |
| ·大肠杆菌质粒抽提 | 第44页 |
| ·大肠杆菌质粒的快速抽提检测 | 第44页 |
| ·链霉菌总DNA的少量快速抽提 | 第44-45页 |
| ·除去DNA溶液中的蛋白质和RNA杂质 | 第45页 |
| ·DNA片段的纯化和回收 | 第45-46页 |
| ·DNA片段的去磷酸化 | 第46-47页 |
| ·DNA片段之间的连接 | 第47页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及DNA的转化 | 第47-48页 |
| ·A-T克隆 | 第48页 |
| ·在大肠杆菌中用IPTG诱导重组蛋白的表达 | 第48页 |
| ·常规PCR技术 | 第48-49页 |
| ·大肠杆菌和链霉菌之间的跨属DNA转移 | 第49-50页 |
| ·地高辛标记的DAN杂交 | 第50-51页 |
| ·显微镜观察 | 第51-52页 |
| ·链霉菌总RNA的抽提 | 第52-53页 |
| ·RNA中DNA杂质的去除 | 第53页 |
| ·RNA的定量以及质量检测 | 第53页 |
| ·链霉菌总蛋白提取 | 第53页 |
| ·SDS-PAGE | 第53-54页 |
| ·细菌双杂交检测蛋白质互作 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-97页 |
| ·链霉菌中纤维素合成酶类似基因的生物信息学分析 | 第55-58页 |
| ·链霉菌中纤维素合成酶类似蛋白 | 第55-56页 |
| ·链霉菌中纤维素合成操纵子 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58页 |
| ·链霉菌纤维素合成酶类似基因中断菌株的构建 | 第58-65页 |
| ·中断载体的构建 | 第58-59页 |
| ·筛选突变体及Southern杂交验证 | 第59-61页 |
| ·突变体的表型观察 | 第61-62页 |
| ·突变体互补载体的构建 | 第62-63页 |
| ·突变体互补的表型观察 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| ·中断菌株表现出表型多样性 | 第65-72页 |
| ·基因中断菌株更易片段化 | 第65-66页 |
| ·透射电镜观察 | 第66-67页 |
| ·孢子丝普通光学观察 | 第67-68页 |
| ·扫描电镜观察 | 第68-69页 |
| ·孢子P.I染色 | 第69-70页 |
| ·静置培养 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| ·CSLA_(SC)基因的功能初步分析 | 第72-79页 |
| ·Calcofluor染色 | 第72-73页 |
| ·cslA基因RT-PCR检测 | 第73-74页 |
| ·CslA基因3'端绿色荧光蛋白基因融合载体的构建 | 第74-76页 |
| ·CslA基因3'端绿色荧光蛋白基因融合的观察结果 | 第76-77页 |
| ·CslA基因5'端绿色荧光蛋白基因融合载体的构建 | 第77-78页 |
| ·CslA基因5'端绿色荧光蛋白基因融合的观察结果 | 第78-79页 |
| ·小结 | 第79页 |
| ·与细胞骨架蛋白DIVIVA的关系 | 第79-84页 |
| ·DivIVA绿色荧光融合载体的构建 | 第79-81页 |
| ·DivIVA绿色荧光融合载体对菌株的影响 | 第81-82页 |
| ·DivIVA绿色荧光融合观察结果 | 第82-83页 |
| ·DivIVA与CslA细菌双杂交互作载体的构建 | 第83页 |
| ·DivIVA与CslA细菌双杂交互作观察结果 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84页 |
| ·与疏水蛋白的关系 | 第84-93页 |
| ·Chapins和Rodlins疏水蛋白的提取 | 第85-86页 |
| ·孢外互补XE突变体 | 第86-87页 |
| ·用EGFP报告系统检测chaplins和rodlins的表达 | 第87-88页 |
| ·EGFP观察结果 | 第88-89页 |
| ·ramP1启动子绿色荧光报告载体的构建 | 第89-90页 |
| ·ramP1启动子绿色荧光报告的结果观察 | 第90-91页 |
| ·SapB小肽的提取 | 第91-92页 |
| ·XE与光秃菌株的胞外型号互补 | 第92-93页 |
| ·小结 | 第93页 |
| ·SCM10.16 ORF的中断 | 第93-96页 |
| ·SCM10.16 ORF的中断载体的构建 | 第93-95页 |
| ·SCM10.16ORF的中断 | 第95-96页 |
| ·链霉菌一种特殊形态分化形成的初步条件摸索 | 第96-97页 |
| 4 讨论与展望 | 第97-100页 |
| ·总结 | 第97-99页 |
| ·展望 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
| 附录(作者简介) | 第111-112页 |
| 一、基本情况 | 第111-112页 |
| 二、学习和工作经历及获学位情况 | 第112页 |
