| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 嗅觉感器及触角感受机制 | 第12-14页 |
| 2 昆虫信息素结合蛋白的研究进展 | 第14-20页 |
| ·昆虫信息素结合蛋白的分子特征 | 第15-16页 |
| ·信息素结合蛋白在触角中的分布 | 第16页 |
| ·昆虫信息素结合蛋白与信息素分子的结合与释放机制 | 第16-18页 |
| ·昆虫信息素结合蛋白的生理功能 | 第18-20页 |
| 3 RNA干扰的研究概况 | 第20-30页 |
| ·RNA干扰的研究的历史 | 第20页 |
| ·RNA干扰的分子机理 | 第20-25页 |
| ·转录后基因沉默机理 | 第21页 |
| ·RNA干扰的起始阶段 | 第21-22页 |
| ·RNA干扰的效应阶段 | 第22-23页 |
| ·RNA解旋酶蛋白家族 | 第23页 |
| ·沉默信号的传递与放大 | 第23-24页 |
| ·蛋白质翻译水平: | 第24页 |
| ·RNA介导的基因组甲基化 | 第24-25页 |
| ·系统性RNA干扰 | 第25-30页 |
| ·线虫中的系统性RNA干扰 | 第25-26页 |
| ·蜜蜂中的系统性RNA干扰 | 第26页 |
| ·果蝇中的细胞自主性RNA干扰 | 第26-27页 |
| ·人类中的系统性RNA干扰 | 第27页 |
| ·德国小蠊中的RNA干扰 | 第27页 |
| ·蝗虫中的RNA干扰 | 第27页 |
| ·其他昆虫中的RNA干扰 | 第27-30页 |
| 第二章 甜菜夜蛾信息素结合蛋白1基因干扰片段的获得与活体导入研究 | 第30-40页 |
| 1 材料与方法 | 第30-36页 |
| ·供试昆虫 | 第31页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·昆虫总RNA的提取 | 第32页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第32页 |
| ·PCR引物设计 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增 | 第33页 |
| ·PCR产物纯化、克隆、测序和序列分析 | 第33-35页 |
| ·PCR产物纯化 | 第33页 |
| ·连接反应 | 第33-34页 |
| ·转化反应 | 第34页 |
| ·小量质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·序列测定 | 第35页 |
| ·序列分析 | 第35页 |
| ·双链RNA的合成与虫体注射 | 第35-36页 |
| ·双链RNA的体外转录合成 | 第35-36页 |
| ·试虫注射 | 第36页 |
| ·注射后试虫存活率调查 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-38页 |
| ·甜菜夜蛾PBP基因靶标片段的克隆与分析 | 第36-37页 |
| ·注射法将双链RNA导入试虫体内 | 第37页 |
| ·体腔注射法将双链RNA导入试虫体内死亡率分析 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 RNA干扰后甜菜夜蛾信息素结合蛋白1基因的表达水平分析 | 第40-46页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| ·供试材料 | 第41页 |
| ·主要试剂和设备 | 第41页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第41页 |
| ·半定量和定量PCR引物设计 | 第41-42页 |
| ·半定量PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·PCR产物纯化、克隆和测序 | 第43页 |
| ·甜菜夜蛾PBP基因的定量PCR分析 | 第43页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第43页 |
| ·甜菜夜蛾PBP基因mRNA表达量比较 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-44页 |
| ·RNA干扰后目标基因mRNA的RT-PCR检测 | 第43-44页 |
| ·RNA干扰后目标基因mRNA的qRT-PCR检测 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 RNA干扰后甜菜夜蛾的电生理检测 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第47页 |
| ·供试材料 | 第47页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第47页 |
| ·触角电位(EAG)测定 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·脱靶效应分析 | 第47-48页 |
| ·注射后不同时间的触角电位分析 | 第48-49页 |
| ·处理48小时后试虫对性信息素主组分的触角电位反应 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 甜菜夜蛾和斜纹夜蛾OR2基因的组织表达谱 | 第52-58页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·供试材料 | 第52-53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第53页 |
| ·PCR引物设计 | 第53-54页 |
| ·PCR扩增 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-56页 |
| ·甜菜夜蛾嗅觉受体基因的组织定位分析 | 第55页 |
| ·斜纹夜蛾受体基因的组织定位分析 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 全文总结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-74页 |
| 附录:攻读硕士学位期间学术论文的发表情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
