| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-27页 |
| ·阿维链霉菌简介 | 第11-13页 |
| ·阿维菌素的生物合成 | 第13-18页 |
| ·阿维菌素起始单元的生物合成 | 第15页 |
| ·阿维菌素聚酮体的生物合成 | 第15-17页 |
| ·阿维菌素聚酮体的后修饰 | 第17页 |
| ·L-齐墩果糖的生物合成及与阿维菌素糖苷配基的连接 | 第17-18页 |
| ·阿维链霉菌生物合成调控 | 第18-21页 |
| ·途径特异性调控 | 第18-19页 |
| ·多效调控 | 第19-20页 |
| ·全局调控 | 第20-21页 |
| ·阿维菌素的化学修饰衍生物及结构类似物 | 第21-24页 |
| ·阿维菌素代谢调控与发酵研究 | 第24-26页 |
| ·本研究的立题依据、目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·材料 | 第27-31页 |
| ·菌株 | 第27-28页 |
| ·质粒 | 第28-29页 |
| ·PCR引物 | 第29页 |
| ·培养基和生化试剂 | 第29-31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-42页 |
| ·菌种培养及保藏 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及质粒的化学转化 | 第33页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第33页 |
| ·链霉菌总DNA的少量快速提取 | 第33-34页 |
| ·PCR | 第34-35页 |
| ·DNA片段的回收 | 第35页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第35-36页 |
| ·DNA连接 | 第36页 |
| ·PCR介导的定向基因置换技术 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌与链霉菌之间的属间接合转移 | 第37页 |
| ·发酵培养 | 第37-38页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第38页 |
| ·阿维菌素及其衍生物的测定 | 第38-39页 |
| ·总糖含量测定 | 第39-40页 |
| ·还原糖的含量测定 | 第40页 |
| ·氨态氮测定 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-59页 |
| ·阿维链霉菌出发菌株BIB9903的复壮 | 第42-43页 |
| ·nsdA基因的中断 | 第43-52页 |
| ·基因中断和基因置换的基本原理 | 第43-44页 |
| ·PCR介导的基因中断和基因置换的基本原理 | 第44-46页 |
| ·nsdA基因中断载体的构建 | 第46-49页 |
| ·pBIB0503通过接合转移导入阿维链霉菌 | 第49页 |
| ·筛选双交换菌株 | 第49页 |
| ·nsdA基因中断的PCR验证 | 第49-50页 |
| ·nsdA基因中断菌株形态变化和发酵产物的HPLC分析 | 第50-52页 |
| ·orfX基因的整合表达 | 第52-59页 |
| ·构建orfX基因表达载体 | 第52-54页 |
| ·orfX基因表达载体通过接合转移导入阿维链霉菌 | 第54页 |
| ·阳性菌株的筛选和PCR验证 | 第54页 |
| ·阳性菌株稳定性验证 | 第54-55页 |
| ·orfX基因整合表达阳性菌株的形态变化及发酵分析 | 第55-59页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第59-62页 |
| ·总结 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
