| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1 植物抗寒研究现状 | 第10-15页 |
| ·质膜与抗寒性的研究 | 第10-11页 |
| ·活性氧清除系统与抗寒性的研究 | 第11页 |
| ·可溶性蛋白质与抗寒性的研究 | 第11页 |
| ·渗透调节物质与抗寒性的研究 | 第11-13页 |
| ·内源激素、生长调节剂与抗寒性的研究 | 第13页 |
| ·多胺与抗寒性的研究 | 第13页 |
| ·人工锻炼与抗寒性的研究 | 第13-14页 |
| ·植物组织形态结构与抗寒性的研究 | 第14页 |
| ·质壁分离与与植物抗寒性的研究 | 第14页 |
| ·光合能力、呼吸强度与抗寒性的研究 | 第14-15页 |
| ·功能基因与抗寒性的研究 | 第15页 |
| 2 植物基因差异表达研究 | 第15-25页 |
| ·表达序列标签技术 | 第16-17页 |
| ·基因表达序列分析 | 第17-18页 |
| ·cDNA微阵列技术 | 第18页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第18-19页 |
| ·代表性差异分析法 | 第19页 |
| ·抑制差减杂交技术 | 第19-25页 |
| 3 研究的目的意义 | 第25-27页 |
| 第二章 柑橘抗寒相关基因的鉴定 | 第27-52页 |
| 1 材料准备 | 第27-28页 |
| ·试验材料 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
| 2 试验方法 | 第28-42页 |
| ·总RNA抽提 | 第28-29页 |
| ·mRNA分离纯化 | 第29-30页 |
| ·抑制性差减杂交 | 第30-39页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第30-31页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第31-32页 |
| ·dS cDNA RSA Ⅰ消化及效率分析 | 第32-33页 |
| ·接头连接 | 第33-34页 |
| ·连接效率分析 | 第34-36页 |
| ·消减杂交 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增 | 第37-39页 |
| ·差减效率检测 | 第39页 |
| ·PCR产物纯化 | 第39-40页 |
| ·克隆转化 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆测序 | 第41页 |
| ·生物信息学分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-52页 |
| ·总RNA提取和MRNA分离纯化结果 | 第42页 |
| ·ds cDNA合成及其RSAⅠ酶切效率分析 | 第42-43页 |
| ·接头连接效率分析结果 | 第43-45页 |
| ·抑制性PCR检测结果 | 第45-46页 |
| ·差减效率检测结果 | 第46页 |
| ·阳性克隆检测结果 | 第46-47页 |
| ·序列对比分析结果 | 第47-52页 |
| 第三章 抗寒相关基因的表达分析 | 第52-66页 |
| 1 抗寒性不同的枳和宫本柑桔苗生长期致死低温的试验 | 第52-55页 |
| ·试验材料与方法 | 第52页 |
| ·试验材料 | 第52页 |
| ·低温处理 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·盆栽苗棉絮包蔸对根际土壤温度的影响 | 第52-53页 |
| ·枳和宫本致死低温的测定 | 第53-55页 |
| 2.Ca~(2+)-ATPase基因在低温锻炼柑橘中的表达分析 | 第55-58页 |
| ·材料处理 | 第56页 |
| ·采样 | 第56页 |
| ·主要生化试剂 | 第56页 |
| ·总RNA提取 | 第56-57页 |
| ·单链cDNA的合成 | 第57页 |
| ·半定量内参引物扩增 | 第57页 |
| ·Ca~(2+)-ATPase基因PCR扩增 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58页 |
| 3 柑橘低温诱导蛋白的基因表达分析 | 第58-62页 |
| ·试验材料 | 第59页 |
| ·蛋白编码基因片段的克隆 | 第59-61页 |
| ·兼并引物设计 | 第59页 |
| ·总DNA提取 | 第59-60页 |
| ·兼并引物以总DNA为模版的扩增 | 第60页 |
| ·扩增片段回收与克隆转化及测序 | 第60-61页 |
| ·片段序列分析及GSP引物设计 | 第61页 |
| ·基因片段特异扩增和表达分析 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-62页 |
| 4 柑橘抗寒相关SSH文库中基因的Northern表达分析 | 第62-66页 |
| ·试验材料 | 第62页 |
| ·总RNA提取 | 第62页 |
| ·Northern杂交 | 第62-65页 |
| ·变性电泳 | 第62页 |
| ·转膜 | 第62-63页 |
| ·紫外胶联 | 第63页 |
| ·预杂交和杂交 | 第63页 |
| ·洗膜 | 第63-64页 |
| ·显影 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-68页 |
| 1 SSH技术在柑橘抗寒相关基因研究上应用的优势与不足 | 第66页 |
| 2 SSH试剂盒在柑橘抗寒相关基因研究应用中的改良 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 1 SSH方法在柑橘研究上的应用 | 第68页 |
| 2 SSH文库鉴定与初步表达分析 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 缩略词及英汉对照 | 第76-77页 |
| 缓冲液、溶液、培养基配方 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简历 | 第80页 |
