| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-16页 |
| ·涡虫-神经进化与发育的模式动物 | 第8-9页 |
| ·氨肽酶研究进展 | 第9-14页 |
| ·Psa基因的发现 | 第10-11页 |
| ·PSA的分子结构特征 | 第11页 |
| ·PSA蛋白的功能 | 第11-13页 |
| ·DjPsa基因的研究意义 | 第13-14页 |
| ·本文研究的主要内容及技术路线 | 第14-16页 |
| ·生物信息学分析 | 第14页 |
| ·涡虫DjPsa基因核酸水平上的研究 | 第14页 |
| ·涡虫DjPsa的生物学功能检测 | 第14-15页 |
| ·DjPsa基因的研究技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 东亚三角涡虫DJPSA基因的克隆及生物信息学分析 | 第16-25页 |
| ·前言 | 第16页 |
| ·材料和方法 | 第16-18页 |
| ·pcDNA3载体和DjPsa基因的连接 | 第17-18页 |
| ·序列比对与系统进化分析 | 第18页 |
| ·结果分析 | 第18-23页 |
| ·pcDNA3载体和DjPsa基因的连接 | 第18-20页 |
| ·东亚三角涡虫DjPsa基因的序列分析 | 第20-23页 |
| ·东亚三角涡虫DjPsa基因的系统进化分析 | 第23页 |
| ·讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 东亚三角涡虫DJPSA基因的表达分析 | 第25-33页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·材料和方法 | 第25-27页 |
| ·RNA探针的合成及纯化 | 第25-26页 |
| ·RNA探针效率检测 | 第26页 |
| ·Northern blot | 第26页 |
| ·DjPsa基因在涡虫体内的表达 | 第26页 |
| ·RT-PCR检测DjPsa基因的表达 | 第26-27页 |
| ·DjPsa基因的免疫组织化学检测 | 第27页 |
| ·结果分析 | 第27-32页 |
| ·Northern blot | 第27-29页 |
| ·DjPsa基因在涡虫体内的表达 | 第29-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 东亚三角涡虫DJPSA基因再生中的干扰及表达 | 第33-41页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·材料和方法 | 第33-36页 |
| ·L4440-DjPsa干扰表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·DjPsa基因dsRNA的合成 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR检测涡虫DjPsa基因表达 | 第36页 |
| ·涡虫DjPsa基因的免疫组织化学检测 | 第36页 |
| ·结果分析 | 第36-39页 |
| ·L4440-DjPsa干扰表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·DjPsa基因RNAi后再生涡虫的表型 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR检测涡虫DjPsa基因的表达 | 第38页 |
| ·涡虫DjPsa基因的免疫组织化学检测 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第五章 东亚三角涡虫PSA蛋白的表达、鉴定及抑菌分析 | 第41-50页 |
| ·前言 | 第41页 |
| ·材料和方法 | 第41-45页 |
| ·pET-28a(+)-DjPsa原核表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·pET-28a(+)-DjPsa原核表达载体的诱导表达 | 第43页 |
| ·重组His-PSA蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·重组His-PSA蛋白的抑菌实验设计 | 第44-45页 |
| ·结果分析 | 第45-49页 |
| ·pET-28a(+)-DjPsa原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·重组His-PSA蛋白的诱导表达与纯化 | 第46-47页 |
| ·重组His-PSA蛋白的抑菌检测 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 总结与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |