| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-42页 |
| ·气道树突状细胞的抗原提呈作用与T细胞的激活 | 第18-22页 |
| ·DC的特点、分类和功能 | 第18-19页 |
| ·气道DC的分布、活化和迁移 | 第19-20页 |
| ·气道DC的抗原提呈作用与T细胞活化 | 第20-21页 |
| ·气道DC的负向免疫调控作用 | 第21-22页 |
| ·哮喘时Th细胞的分化调控 | 第22-34页 |
| ·影响Th细胞分化的因素 | 第22-28页 |
| ·DC诱导哮喘Th2细胞优势分化 | 第28-29页 |
| ·Th2细胞的发育与GATA-3 | 第29-31页 |
| ·T-bet与Th1细胞因子基因的转录调节及Th分化 | 第31-34页 |
| ·T-bet与哮喘 | 第34页 |
| ·Treg细胞与哮喘 | 第34-37页 |
| ·Treg细胞的分类与功能 | 第35页 |
| ·Foxp3和CD4~+CD25~+Treg细胞 | 第35-36页 |
| ·Treg细胞与哮喘发生机制 | 第36-37页 |
| ·哮喘的免疫治疗战略 | 第37-42页 |
| ·哮喘的SIT | 第37-39页 |
| ·哮喘的非特异性免疫治疗 | 第39-42页 |
| 第二章 转录因子T-bet对婴幼儿喘息性支气管炎免疫调控作用的研究 | 第42-54页 |
| ·实验材料和仪器 | 第43-46页 |
| ·实验对象 | 第43-44页 |
| ·实验试剂 | 第44页 |
| ·试剂配制 | 第44-45页 |
| ·实验耗材 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·淋巴细胞的分离和体外孵育 | 第46页 |
| ·培养上清液中细胞因子IL-4及IFN-γ浓度测定: | 第46页 |
| ·总RNA提取 | 第46-47页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第47页 |
| ·PCR检测T-bet和GATA-3基因表达水平 | 第47-48页 |
| ·Western-blot检测T-bet和GATA-3的蛋白表达水平 | 第48页 |
| ·统计学处理 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-51页 |
| ·淋巴细胞上清液中IFN-γ和IL-4水平 | 第48-49页 |
| ·RT-PCR检测T-bet mRNA和GATA-3 mRNA的表达水平 | 第49页 |
| ·喘支患儿淋巴细胞T-bet及GATA-3的蛋白表达水平 | 第49页 |
| ·细胞因子IFN-γ、IL-4与转录因子T-bet、GATA-3 mRNA及蛋白水平的相关性分析 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第三章 小鼠T-bet基因腺相关病毒载体的构建与表达 | 第54-80页 |
| ·实验材料和仪器 | 第55-57页 |
| ·实验动物 | 第55页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第55-56页 |
| ·细胞株和宿主菌株 | 第56页 |
| ·质粒 | 第56-57页 |
| ·主要培养基 | 第57页 |
| ·主要实验耗材 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-69页 |
| ·小鼠T-bet基因的克隆及鉴定 | 第57-63页 |
| ·携带小鼠T-bet基因的重组腺相关病毒的制备与鉴定 | 第63-69页 |
| ·实验结果 | 第69-76页 |
| ·小鼠T-bet基因的克隆和鉴定 | 第69-72页 |
| ·重组腺相关病毒rAAV-T-bet的制备和鉴定 | 第72-76页 |
| ·讨论 | 第76-80页 |
| 第四章 rAAV介导T-bet基因经鼻传递对支气管哮喘免疫调节作用的研究 | 第80-104页 |
| ·实验材料和仪器 | 第81-83页 |
| ·实验动物 | 第81页 |
| ·要试剂和试剂盒 | 第81-82页 |
| ·引物 | 第82-83页 |
| ·主要仪器 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83-90页 |
| ·实验动物分组和哮喘模型的建立 | 第83-84页 |
| ·实验标本的获取与处理程序 | 第84-85页 |
| ·BALF中细胞的计数和分类 | 第85页 |
| ·小鼠脾脏单个核细胞的分离和活化 | 第85页 |
| ·BALF中细胞因子水平的测定 | 第85页 |
| ·血清IgE及OVA特异性IgE的测定 | 第85-86页 |
| ·小鼠呼吸道病理学改变 | 第86-87页 |
| ·小鼠血清、BALF和脾细胞上清液中Blys水平的测定 | 第87页 |
| ·RT-实时荧光定量PCR检测支气管肺组织中T-bet、GATA-3和Foxp3的mRNA水平 | 第87-88页 |
| ·Western-blot检测支气管肺组织中T-bet、GATA-3和Foxp3的蛋白水平 | 第88页 |
| ·免疫组织化学法测定支气管肺组织中T-bet、GATA-3和Foxp3的表达水平 | 第88-89页 |
| ·免疫荧光法检测小鼠脾脏单个核细胞T-bet的表达 | 第89-90页 |
| ·统计学方法 | 第90页 |
| ·结果 | 第90-98页 |
| ·各组实验小鼠的一般表现 | 第90页 |
| ·BALF细胞总数及细胞分类 | 第90-91页 |
| ·BALF中IL-4、IL-5及IFN-γ水平 | 第91页 |
| ·血清IgE及OVA特异性IgE的水平 | 第91-92页 |
| ·肺组织形态学改变 | 第92-93页 |
| ·小鼠血清、BALF和脾细胞培养上清液中Blys水平 | 第93页 |
| ·肺组织中T-bet、GATA-3和Foxp3的mRNA水平 | 第93-95页 |
| ·Western-blot检测肺组织中T-bet、GATA-3和Foxp3的蛋白水平 | 第95页 |
| ·免疫组化检测肺组织中T-bet、GATA-3和Foxp3蛋白的细胞表达水平 | 第95-96页 |
| ·T-bet在脾细胞中的表达水平 | 第96-98页 |
| ·讨论 | 第98-104页 |
| 结论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第121页 |
