中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-57页 |
1 细菌的群体感应 | 第16-27页 |
·概述 | 第16-18页 |
·革兰氏阴性细菌中的群体感应系统 | 第18-22页 |
·AHLs分子结构及其合成 | 第18-20页 |
·LuxR类调节蛋白 | 第20-21页 |
·费氏弧菌的发光机制 | 第21-22页 |
·根癌土壤杆菌的TraI/TraR毒性机制 | 第22页 |
·革兰氏阳性细菌中的群体感应系统 | 第22-25页 |
·寡肽类信号分子及其受体传导过程 | 第22-23页 |
·金黄色葡萄球菌中的群体感应系统 | 第23-24页 |
·革兰氏阳性菌群体感应系统的生理学功能 | 第24-25页 |
·其它信号分子介导的群体感应系统 | 第25-27页 |
·AI-2信号分子 | 第25-26页 |
·其它信号分子 | 第26-27页 |
2 根瘤菌与群体感应 | 第27-33页 |
·根瘤菌—豆科作物共生结瘤固氮作用 | 第27-28页 |
·根瘤菌的结瘤过程 | 第27页 |
·结瘤因子的结构和功能 | 第27-28页 |
·豆科植物根瘤菌的最新分类 | 第28页 |
·根瘤菌中的群体感应系统 | 第28-33页 |
·根瘤菌属中的群体感应 | 第30-31页 |
·中华根瘤菌属中的群体感应 | 第31-32页 |
·慢生型根瘤菌属中的群体感应 | 第32-33页 |
3 病原细菌与群体感应 | 第33-35页 |
·铜绿假单孢菌 | 第33-34页 |
·霍乱弧菌 | 第34-35页 |
4 群体感应信号干扰 | 第35-39页 |
·降解信号分子 | 第35-37页 |
·酶对信号分子的降解 | 第35-37页 |
·化学降解信号分子 | 第37页 |
·抑制信号分子的合成 | 第37-38页 |
·降低R蛋白的活性 | 第38页 |
·种内与种间竞争 | 第38-39页 |
5 生物膜 | 第39-42页 |
·细菌生物膜的形成 | 第39页 |
·细菌生物膜形成的遗传基础 | 第39-40页 |
·生物膜内的信号传递 | 第40-42页 |
6 群体感应研究方法与技术 | 第42-47页 |
·物理学检测手段 | 第42页 |
·构建生物检测菌株来进行检测 | 第42-46页 |
·生物检测菌株的研究进展 | 第43-44页 |
·高效生物检测菌株KYC55(pJZ372)(pJZ384)(pJZ410)的构建 | 第44-46页 |
·薄层层析法 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-57页 |
第二章 自体诱导物的检测 | 第57-75页 |
第一节 中慢生根瘤菌(植物共生细菌)自体诱导物的检测 | 第58-65页 |
1 材料与方法 | 第58-61页 |
·菌株 | 第58页 |
·培养基与培养条件 | 第58-59页 |
·试剂 | 第59页 |
·生长曲线 | 第59页 |
·自体诱导物检测(β-半乳糖苷酶法) | 第59-60页 |
·C_(18)反相薄层层析(TLC) | 第60-61页 |
2 结果与分析 | 第61-64页 |
·生长曲线和AHL活性检测 | 第61-63页 |
·不同种菌株的AHL类别 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-65页 |
第二节 肠道细菌(动物病原细菌)自体诱导物的检测 | 第65-75页 |
1 材料与方法 | 第65-67页 |
·菌株 | 第65-66页 |
·培养基与培养条件 | 第66-67页 |
·试剂 | 第67页 |
·自体诱导物检测 | 第67页 |
·C_(18)反相薄层层析 | 第67页 |
2 结果与分析 | 第67-70页 |
·AHL活性检测 | 第67-69页 |
·不同种菌株的AHL类别 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-72页 |
本章小结 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
第三章 外源蛋白介导的群体感应系统信号干扰 | 第75-105页 |
第一节 TraR调控蛋白超量表达的竞争影响 | 第75-90页 |
1 材料与方法 | 第75-79页 |
·菌株与质粒 | 第75页 |
·培养基与培养条件 | 第75页 |
·试剂和酶 | 第75-76页 |
·质粒DNA的小量提取 | 第76-77页 |
·质粒DNA的小量酶切 | 第77页 |
·电转化 | 第77页 |
·生长曲线 | 第77-78页 |
·自体诱导物检测 | 第78页 |
·免疫沉淀反应 | 第78页 |
·Western immunoblots | 第78-79页 |
·接合 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-89页 |
·TraR在M.huakuii 93中的表达 | 第79-80页 |
·TraR在M.huakuii 93中的活性 | 第80-81页 |
·TraR的超量表达对M.huakuii 93群体感应系统的影响 | 第81-84页 |
·胞内、胞外自体诱导物水平的比较 | 第84-86页 |
·TraR蛋白梯度强度表达 | 第86-87页 |
·TraR在M.tianshanense 3306中的超量表达 | 第87-89页 |
3 讨论 | 第89-90页 |
第二节 水解酶AttM对自体诱导物的降解影响 | 第90-101页 |
1 材料与方法 | 第90-92页 |
·菌株与质粒 | 第90页 |
·培养基与培养条件 | 第90页 |
·试剂和酶 | 第90页 |
·质粒DNA的小量提取 | 第90页 |
·电转化 | 第90页 |
·接合 | 第90页 |
·生长曲线 | 第90页 |
·自体诱导物检测 | 第90-91页 |
·接合 | 第91页 |
·共培养降解 | 第91-92页 |
2 结果与分析 | 第92-99页 |
·AttM对中慢生华癸根瘤菌M.huakuii 93群体感应系统的影响 | 第92-93页 |
·AttM对根癌土壤杆菌A.tumefaciens R10群体感应系统的影响 | 第93-95页 |
·AttM对中慢生天山根瘤菌M.tianshanense 3306群体感应系统的影响 | 第95-96页 |
·AttM对临床分离肠道病原细菌自体诱导物的影响 | 第96-99页 |
·共培养条件选择 | 第96-98页 |
·病原细菌与DH5a(pYC146)共培养对AI活性的影响 | 第98-99页 |
3 讨论 | 第99-101页 |
本章小结 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-105页 |
第四章 群体感应对生理功能的影响 | 第105-121页 |
第一节 对中慢生根瘤菌生理功能的影响 | 第105-114页 |
1 材料与方法 | 第106-108页 |
·菌株 | 第106页 |
·培养基与培养条件 | 第106页 |
·试剂和种子 | 第106页 |
·生物膜 | 第106-107页 |
·种子的表面消毒和催芽 | 第107页 |
·根毛卷曲 | 第107页 |
·根毛吸附 | 第107-108页 |
·结瘤实验 | 第108页 |
2 结果与分析 | 第108-112页 |
·TraR超量表达对中慢生华癸根瘤菌影响 | 第108-111页 |
·对生物膜的影响 | 第108-109页 |
·对根毛卷曲的影响 | 第109页 |
·对根毛吸附的影响 | 第109-111页 |
·对共生结瘤的影响 | 第111页 |
·AttM水解酶对中慢生天山根瘤菌根毛吸附的影响 | 第111-112页 |
3 讨论 | 第112-114页 |
第二节 对粘质沙雷氏菌生理特性的影响 | 第114-118页 |
1 材料与方法 | 第114-115页 |
·菌株与质粒 | 第114页 |
·培养基与培养条件 | 第114页 |
·接合 | 第114页 |
·AI缺失菌株的筛选 | 第114-115页 |
·游动性观察 | 第115页 |
·共培养降解 | 第115页 |
·生物膜 | 第115页 |
2 结果与分析 | 第115-117页 |
·自体诱导物的缺失对生物膜的影响 | 第115-116页 |
·自体诱导物的缺失对游动性的影响 | 第116-117页 |
3 讨论 | 第117-118页 |
本章小结 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-121页 |
全文总结 | 第121-124页 |
全文创新点 | 第124-125页 |
附录一 符号与缩略语说明 | 第125-126页 |
附录二 攻读博士学位期间发表的论文 | 第126-127页 |
致谢 | 第127页 |