中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
符号说明 | 第12-14页 |
一、前言 | 第14-18页 |
二、实验材料和方法 | 第18-28页 |
(一) 实验材料 | 第18-21页 |
1.建立小鼠同种皮肤移植模型的相关实验材料 | 第18页 |
2.制备小鼠脾细胞及纯化T细胞和CD4~+ T细胞的实验材料 | 第18页 |
3.混合淋巴细胞反应(~3H—TdR掺入法)的实验材料 | 第18-19页 |
4.细胞总RNA提取的实验材料 | 第19-20页 |
5.RT反应的实验材料 | 第20页 |
6.PCR反应的实验材料 | 第20页 |
7.DAN电泳的实验材料 | 第20-21页 |
8.流式细胞术所用实验材料 | 第21页 |
9.测定LI-10的实验材料及仪器 | 第21页 |
10.实验用药物 | 第21页 |
(二) 实验方法 | 第21-28页 |
1.小鼠同种皮肤移植模型的制备 | 第21-22页 |
2.CD4~+T细胞介导的SCID小鼠同种皮肤移植模型制备 | 第22页 |
3.同种移植模型的耐受诱导及分组 | 第22页 |
4.皮肤移植物排斥的组织学鉴定 | 第22页 |
5.制备脾T细胞和CD4~+T细胞的实验方法 | 第22-23页 |
6.脾CD4~+T细胞和T细胞体外培养 | 第23页 |
7.流式细胞术测定CD4~+CD25~+T细胞比例 | 第23-24页 |
8.混合淋巴细胞反应(~3H—TdR掺入法) | 第24页 |
9.TRIzol一步法提取细胞总RNA | 第24-25页 |
10.RT-PCR | 第25-26页 |
11.PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
12.ELISA法测定IL-10 | 第27页 |
13.过继转移实验 | 第27页 |
14.统计学分析 | 第27-28页 |
三、实验结果 | 第28-40页 |
(一) 体内实验结果 | 第28-31页 |
1.移植皮片存活曲线 | 第28页 |
2.移植皮片排斥状况及小鼠一般状况 | 第28-30页 |
3.小鼠同种移植后移植皮片的组织学鉴定 | 第30-31页 |
(二) 体外实验结果 | 第31-37页 |
1.流式细胞术检测CD4~+CD25~+T细胞比例 | 第31-34页 |
2.混合淋巴细胞反应检测T细胞特异性增殖水平 | 第34-35页 |
3.ELISA检测IL-10水平 | 第35-36页 |
4.RT-PCR检测Foxp3表达状况 | 第36-37页 |
(三) 过继免疫反应实验结果 | 第37-40页 |
1.过继输入CsA组CD4~+T细胞后移植皮片存活情况 | 第37-38页 |
2.过继输入雷帕霉素组CD4~+T细胞后移植皮片存活情况 | 第38-40页 |
四、讨论 | 第40-49页 |
1.诱导模型耐受的药物选择 | 第41页 |
2.Rapa体外作用对耐受模型CD4~+CD25~+调节性T细胞影响 | 第41-46页 |
3.过继转移实验 | 第46-49页 |
五、小结 | 第49-50页 |
六、参考文献 | 第50-57页 |
七、致谢 | 第57-58页 |
八、攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第58-59页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第59页 |