中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
引言 | 第8-10页 |
1. 文献综述 | 第10-22页 |
·福建省稻田资源概况 | 第10页 |
·土壤微生物简介 | 第10页 |
·氮素的重要性和固氮作用 | 第10-12页 |
·氮素的重要作用 | 第10-11页 |
·生物固氮 | 第11-12页 |
·水稻与固氮微生物之间的关系 | 第12页 |
·生物固氮的研究进展 | 第12-14页 |
·水稻土固氮微生物的主要类群 | 第14-15页 |
·土壤微生物群落研究方法进展 | 第15-17页 |
·PCR-DGGE技术的原理及应用前景 | 第17-21页 |
·本实验研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-32页 |
·供试材料 | 第22页 |
·药品、试剂与仪器 | 第22-23页 |
·药品与试剂 | 第22页 |
·仪器 | 第22-23页 |
·试验方法 | 第23-28页 |
·实验设计 | 第23页 |
·土壤总DNA的提取 | 第23-24页 |
·土壤DNA的纯化 | 第24-25页 |
·对土壤总DNA进行16S rDNA基因的套式PCR扩增 | 第25-26页 |
·对土壤总DNA进行固氮基因nifH的套式PCR扩增 | 第26-27页 |
·电泳检测 | 第27页 |
·套式PCR反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析 | 第27页 |
·变性梯度凝胶电泳(DGGE)后的特异条带分析 | 第27-28页 |
·利用传统平板培养的方法分离土壤中的固氮菌 | 第28-32页 |
·分离土壤中的固氮菌并观察形态 | 第28-29页 |
·应用气相色谱技术分析全细胞脂肪酸 | 第29-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
·PCR-DGGE的方法分析土壤DNA | 第32-41页 |
·两种方法提取土壤总DNA的结果比较 | 第32-33页 |
·稻田土壤微生物的套式PCR扩增 | 第33-35页 |
·套式PCR产物的DGGE分析 | 第35-39页 |
·聚类分析结果 | 第39-41页 |
·传统平板培养方法分离土壤中固氮菌的结果 | 第41-43页 |
·分离菌的菌落形态 | 第41页 |
·电镜观察细菌细胞形态结果 | 第41页 |
·脂肪酸分析结果 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-48页 |
·稻田土壤微生物多态性分析的PCR-DGGE技术建立 | 第43-44页 |
·土壤DNA的提取质量 | 第43页 |
·DGGE技术的应用 | 第43-44页 |
·福建不同生态区域稻田土壤细菌的遗传多态性 | 第44-46页 |
·稻田土壤细菌种类的地区多态性 | 第44-45页 |
·稻田土壤固氮细菌组成的地区多态性 | 第45-46页 |
·常规平板培养的固氮细菌及其鉴定 | 第46-48页 |
5 主要结论与展望 | 第48-49页 |
6 参考文献 | 第49-56页 |
7 附录 | 第56-61页 |
·分离培养固氮菌的菌落外形 | 第56-57页 |
·电镜观察到的细胞形态 | 第57-59页 |
·培养基 | 第59页 |
·测序结果 | 第59-61页 |
致谢 | 第61页 |