| 引言 | 第1-15页 |
| 1.链霉菌及其抗生素在植物保护上的作用 | 第10页 |
| 2.链霉菌基因组特征及次生代谢基因簇 | 第10-11页 |
| 3.链霉菌次生代谢途径研究及相关基因克隆策略 | 第11-12页 |
| 4.链霉菌基因组信息与次生代谢途径改造 | 第12-14页 |
| ·提高菌株高产性能 | 第12-13页 |
| ·应用基因工程方法获得新产物 | 第13-14页 |
| 5.玫瑰黄链霉菌研究进展及本项目的立题依据和意义 | 第14-15页 |
| ·玫瑰黄链霉菌研究进展 | 第14页 |
| ·本项目的立题依据、技术路线和研究意义 | 第14-15页 |
| 第一章 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗生素提纯分析 | 第15-22页 |
| 1 材料与方法 | 第15-17页 |
| ·试验菌株 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·试验方法 | 第16-17页 |
| 2 结果与分析 | 第17-21页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63摇瓶发酵及抗生素的提取 | 第17-18页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63粗提纯抗生素的抑菌活性定量测定 | 第18页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63粗提纯抗生素的薄层层析及制备 | 第18-19页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63抗生素组分Ⅲ的TLC和HPLC分析 | 第19-21页 |
| 3 讨论 | 第21页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63的发酵及生物活性测定 | 第21页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63抗生素的薄层制备 | 第21页 |
| 4 结论 | 第21-22页 |
| 第二章 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗性基因克隆及表达 | 第22-40页 |
| 1 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·供试菌株与质粒 | 第23页 |
| ·抗生素和氨基酸 | 第23页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第23页 |
| ·DNA分子量标准 | 第23-24页 |
| ·缓冲液 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-37页 |
| ·抗生素组分Ⅲ最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第30-31页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63基因组DNA提取及部分酶切浓度的确定 | 第31页 |
| ·基因组DNA大量酶切及回收 | 第31-32页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63抗性基因的克隆及筛选 | 第32-33页 |
| ·抗性转化子SR228的质粒提取及酶切分析 | 第33页 |
| ·pSR228插入外源DNA片段基因序列测定 | 第33-36页 |
| ·pSR228的功能验证 | 第36-37页 |
| 3.讨论 | 第37-39页 |
| ·链霉菌Men-myco-93-63抗性基因克隆的筛选 | 第37页 |
| ·pSR228外源插入片段的ORF分析与序列比对 | 第37-38页 |
| ·玫瑰黄链霉菌的抗性基因 | 第38-39页 |
| 4.结论 | 第39-40页 |
| 第三章 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗生素生物合成基因的克隆 | 第40-56页 |
| 1.材料与方法 | 第41-42页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第41页 |
| ·化学试剂及缓冲液及工具酶 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-53页 |
| ·玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63基因组DNA酶切及转化 | 第42-43页 |
| ·抑菌活性转化子的筛选 | 第43页 |
| ·阳性转化子SA-3质粒提取及酶切分析 | 第43-44页 |
| ·pSA3的功能验证及活性检测 | 第44页 |
| ·pSA3的亚克隆及基因序列测定、分析 | 第44-52页 |
| ·pSA3转化变铅青链霉菌TK54菌株SA-3的抑菌活性及活性物质的提取分析 | 第52-53页 |
| 3.讨论 | 第53-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-77页 |
| 附录A 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗性基因 | 第63-64页 |
| 附录B 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63合成相关基因——pSA31外源片段 | 第64-66页 |
| 附录C 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63合成相关基因——pSA32外源片段 | 第66-67页 |
| 附录D 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63合成相关基因——pSA33外源片段 | 第67-68页 |
| 附录E 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63合成相关基因——pSA321外源片段 | 第68-69页 |
| 附录F 抗性基因ORF1系统进化树分析 | 第69-70页 |
| 附录G 抗性基因ORF2系统进化树分析 | 第70-71页 |
| 附录H 抗性基因ORF4系统进化树分析 | 第71-72页 |
| 附录I pSA32 ORF2系统进化树分析 | 第72-73页 |
| 附录J pSA321 ORF2系统进化树分析 | 第73-74页 |
| 附录K 抗生素活性组分ⅢHPLC分析 | 第74-77页 |
| 作者简历 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
