英语缩略词语 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
引言 | 第17-19页 |
第一章 青娥丸及其拆方的雌激素样作用体内药效比较研究 | 第19-37页 |
1.实验材料 | 第19-20页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 药品和试剂 | 第19-20页 |
1.3 实验药物的配制 | 第20页 |
2.实验方法 | 第20-25页 |
2.1 去卵巢大鼠模型的建立 | 第20页 |
2.2 动物分组及给药 | 第20-21页 |
2.3 取材方法 | 第21页 |
2.4 血清指标测定 | 第21页 |
2.5 Western blot方法 | 第21-24页 |
2.5.1 总蛋白提取 | 第21页 |
2.5.2 BCA法检测蛋白含量 | 第21-22页 |
2.5.3 实验溶液的配制 | 第22-23页 |
2.5.4 SDS-PAGE电泳 | 第23页 |
2.5.5 转膜 | 第23-24页 |
2.5.6 封闭 | 第24页 |
2.5.7 抗体孵育 | 第24页 |
2.5.8 显影 | 第24页 |
2.6 子宫、肝脏、肾上腺形态学检查 | 第24-25页 |
2.7 子宫ER免疫组织化学染色及定量分析 | 第25页 |
2.8 统计学分析 | 第25页 |
3.结果 | 第25-34页 |
3.1 对血清中各激素的影响 | 第25-26页 |
3.2 对血脂代谢的影响 | 第26-27页 |
3.3 对芳香化酶及神经递质类的影响 | 第27-28页 |
3.4 对血清中超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA的影响 | 第28-29页 |
3.5 青娥方及其拆方配伍对去势大鼠子宫、肾上腺、肝脏形态学的影响 | 第29-31页 |
3.6 免疫组化法研究青娥方及其拆方配伍对去势大鼠子宫雌激素受体表达的影响 | 第31-33页 |
3.7 WB法检测大鼠子宫ERα、β蛋白表达 | 第33-34页 |
4.讨论与分析 | 第34-37页 |
第二章 青娥方及其配伍组合物的雌激素样作用体外研究 | 第37-53页 |
第一节 青娥方及配伍组合物对MCF-7细胞的增殖作用 | 第37-42页 |
1.实验材料 | 第37-40页 |
1.1 化学品和试剂 | 第37-39页 |
1.2 主要仪器设备 | 第39-40页 |
2.方法 | 第40页 |
2.1 对MCF-7细胞增殖作用 | 第40页 |
2.1.1 细胞培养 | 第40页 |
2.1.2 CCK-8细胞增殖试验 | 第40页 |
3.结果 | 第40-42页 |
第二节 青娥方及配伍组合物对稳定转染ERE报告基因的HEK293 细胞荧光素酶表达的影响 | 第42-44页 |
1.实验材料 | 第42页 |
1.1 材料 | 第42页 |
2.方法 | 第42-43页 |
2.1 细胞培养 | 第42页 |
2.2 筛选具有稳定转染目的基因的细胞系 | 第42-43页 |
2.3 ERE报告基因荧光素酶表达检测 | 第43页 |
3.结果 | 第43-44页 |
第三节 Western Blot检测青娥方及其拆方对MCF-7细胞中ERα、ERβ、PS2表达的影响 | 第44-47页 |
1.实验材料 | 第45页 |
1.1 材料 | 第45页 |
2.方法 | 第45页 |
2.1 细胞药物处理 | 第45页 |
2.2 总蛋白提取 | 第45页 |
2.3 总蛋白含量测定 | 第45页 |
2.4 Western-blot | 第45页 |
3.结果 | 第45-47页 |
第四节 实时荧光定量PCR法分析检测青娥方及其拆方对MCF-7细胞中ERα、ERβ和PS2的mRNA表达水平的影响 | 第47-53页 |
1.实验材料 | 第47页 |
1.1 材料 | 第47页 |
2.方法 | 第47-49页 |
2.1 细胞培养 | 第47页 |
2.2 MCF-7 细胞总RNA的提取 | 第47页 |
2.3 检测总RNA纯度测定 | 第47页 |
2.4 去基因组 | 第47-48页 |
2.5 逆转录 | 第48页 |
2.6 Real-Time Two Step PCR反应 | 第48-49页 |
2.6.1 引物序列 | 第48-49页 |
2.6.2 反应液的配制 | 第49页 |
2.6.3 Real-Time Two Step PCR反应 | 第49页 |
3.统计学分析 | 第49页 |
4.结果 | 第49-51页 |
5.讨论 | 第51-53页 |
第三章 杜仲对于MCF-7细胞中GPR30信号通路的影响 | 第53-57页 |
1.实验材料 | 第53-54页 |
1.1 细胞株 | 第53页 |
1.2 药物和试剂 | 第53-54页 |
1.3 实验仪器 | 第54页 |
2.实验方法 | 第54-55页 |
2.1 细胞培养 | 第54页 |
2.2 药物配制与储存 | 第54页 |
2.3 细胞的加药培养 | 第54-55页 |
2.4 呈色与比色 | 第55页 |
2.5 western blot检测杜仲对GPR30 蛋白的表达情况 | 第55页 |
2.5.1 总蛋白提取 | 第55页 |
2.5.2 总蛋白含量测定 | 第55页 |
2.5.3 Western Blot | 第55页 |
3.结果 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
References | 第59-63页 |
附录1 文献综述 中药复方配伍研究进展 | 第63-73页 |
参考文献 | 第70-73页 |
附录2 攻读硕士学位期间成果 | 第73页 |