α-乙酰乳酸脱羧酶产生菌的筛选及其基因的克隆和表达研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 啤酒发酵中双乙酰的产生 | 第9-11页 |
| 2 ALDC 酶在啤酒发酵中的应用 | 第11-12页 |
| 3 ALDC 酶的理化特性和酶学特性 | 第12-13页 |
| 4 ALDC 的分子生物学研究 | 第13-14页 |
| 5 ALDC 基因的克隆和表达研究 | 第14-17页 |
| 第一章 | 第17-26页 |
| 摘要 | 第17-18页 |
| 1 材料 | 第18页 |
| ·土样来源 | 第18页 |
| ·主要设备 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-21页 |
| ·底物的合成 | 第18-20页 |
| ·菌株的分离与纯化 | 第20页 |
| ·菌株的鉴定 | 第20页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第20-21页 |
| ·酶活力的测定 | 第21页 |
| ·酶活的计算公式 | 第21页 |
| 3 结果和讨论 | 第21-26页 |
| ·底物的合成和测定 | 第21-22页 |
| ·Α-乙酰乳酸酶产生菌的筛选 | 第22-23页 |
| ·菌株的初步鉴定 | 第23-26页 |
| 第二章 | 第26-40页 |
| 摘要 | 第26-27页 |
| 1 实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌种和质粒 | 第27页 |
| ·酶和试剂 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·溶液配制 | 第27-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-33页 |
| ·总DNA 的提取 | 第29页 |
| ·小批量质粒DNA 的快速提取 | 第29页 |
| ·利用PCR 的方法扩增目的基因 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·大肠杆菌E.COLI 的转化 | 第30-31页 |
| ·DNA 片断回收 | 第31页 |
| ·重组菌的培养与诱导表达 | 第31页 |
| ·表达产物的酶活测定 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第31-33页 |
| 3. 结果与讨论 | 第33-40页 |
| ·ALDC 基因的PCR 扩增 | 第33-34页 |
| ·ALDC 基因的克隆和序列分析 | 第34-37页 |
| ·基因工程菌的构建 | 第37-38页 |
| ·基因工程菌ALDC 基因的表达 | 第38-40页 |
| 第三章 | 第40-47页 |
| 摘要 | 第40页 |
| ABSTRACT | 第40-41页 |
| 1 材料和方法 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| 2. 结果 | 第42-46页 |
| ·ALDC 基因的克隆 | 第42页 |
| ·ALDC 基因的测序 | 第42-43页 |
| ·表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·ALDC 基因的原核表达及酶活测定 | 第44-46页 |
| ·DH5ɑ(PBVEDAD)中质粒的稳定性分析 | 第46页 |
| 3. 讨论 | 第46-47页 |
| 全文小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 读硕士期间发表文章情况 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
