中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
材料与方法 | 第14-32页 |
一、材料 | 第14-18页 |
(一) 试剂及用液 | 第14-16页 |
(二) 主要仪器 | 第16-17页 |
(三) PCR引物 | 第17-18页 |
二、方法 | 第18-32页 |
(一) 外周血淋巴细胞的分离 | 第18-19页 |
(二) 淋巴细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
(三) 逆转录生成cDNA | 第20-21页 |
(四) 以cDNA为模板扩增β-actin以验证cDNA质量 | 第21页 |
(五) RT-PCR扩增轻链和重链基因片段及纯化回收 | 第21-22页 |
(六) 噬粒pComb3的扩增和感受态大肠杆菌XL1-Blue的制备 | 第22-24页 |
(七) 轻链库的构建及鉴定 | 第24-26页 |
(八) 辅助噬菌体VCSM13的扩增和滴度测定 | 第26-27页 |
(九) 噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定 | 第27-30页 |
(十) gp96特异性抗体的富集与淘选 | 第30-32页 |
结果 | 第32-44页 |
一、提取外周血淋巴细胞总RNA | 第32页 |
二、以淋巴细胞总RNA为模板逆转录生成cDNA及鉴定 | 第32页 |
三、PCR扩增重链Fd段和轻链基因 | 第32-34页 |
四、噬粒pComb3的扩增 | 第34-35页 |
五、双酶切pComb3和轻链PCR产物 | 第35页 |
六、轻链库的构建及鉴定 | 第35-37页 |
七、噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定 | 第37-42页 |
八、gp96特异性抗体的富集与淘选 | 第42-44页 |
讨论 | 第44-54页 |
小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
综述 | 第61-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
附录:在读期间发表的文章和参编的著作 | 第86-87页 |
论著 | 第87-115页 |