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人天然Fab段噬菌体抗体库的构建及抗gp96抗体的初步筛选

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
缩略语表第10-12页
前言第12-14页
材料与方法第14-32页
 一、材料第14-18页
  (一) 试剂及用液第14-16页
  (二) 主要仪器第16-17页
  (三) PCR引物第17-18页
 二、方法第18-32页
  (一) 外周血淋巴细胞的分离第18-19页
  (二) 淋巴细胞总RNA的提取第19-20页
  (三) 逆转录生成cDNA第20-21页
  (四) 以cDNA为模板扩增β-actin以验证cDNA质量第21页
  (五) RT-PCR扩增轻链和重链基因片段及纯化回收第21-22页
  (六) 噬粒pComb3的扩增和感受态大肠杆菌XL1-Blue的制备第22-24页
  (七) 轻链库的构建及鉴定第24-26页
  (八) 辅助噬菌体VCSM13的扩增和滴度测定第26-27页
  (九) 噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定第27-30页
  (十) gp96特异性抗体的富集与淘选第30-32页
结果第32-44页
 一、提取外周血淋巴细胞总RNA第32页
 二、以淋巴细胞总RNA为模板逆转录生成cDNA及鉴定第32页
 三、PCR扩增重链Fd段和轻链基因第32-34页
 四、噬粒pComb3的扩增第34-35页
 五、双酶切pComb3和轻链PCR产物第35页
 六、轻链库的构建及鉴定第35-37页
 七、噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定第37-42页
 八、gp96特异性抗体的富集与淘选第42-44页
讨论第44-54页
小结第54-55页
参考文献第55-61页
综述第61-85页
致谢第85-86页
附录:在读期间发表的文章和参编的著作第86-87页
论著第87-115页

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