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利用单酶切cDNA-AFLP技术分离玉米对生性状相关基因差异表达片段

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-5页
目录第5-7页
插图和附表清单第7-8页
文献综述第8-15页
 1. 差异表达基因的分离方法概述第8-11页
 2. cDNA-AFLP 技术的原理及其应用第11-13页
 3. 单酶切cDNA-AFLP分离差异表达片段的应用第13-15页
引言第15-18页
材料和方法第18-28页
 1. 试验材料第18页
   ·玉米近等基因系的构建第18页
   ·玉米栽培与取材第18页
 2. 仪器设备和试剂第18-19页
   ·仪器设备第18页
   ·化学试剂第18-19页
 3. 试验方法第19-28页
   ·总 RNA 的提取与总 RNA 池的构建第19-20页
     ·总RNA的提取和检测第19-20页
     ·对生、互生总 RNA 池的构建第20页
   ·单酶切cDNA-AFLP 分析第20-23页
     ·cDNA合成第20-21页
     ·cDNA单酶切和连接第21-22页
     ·cDNA酶切片段的预扩增第22-23页
     ·预扩产物的选择扩增第23页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第23-25页
     ·胶板的制备第23-24页
     ·电泳第24页
     ·银染第24-25页
   ·差异片段的回收、克隆和鉴定第25-27页
     ·差异片段的回收第25页
     ·二次扩增差异条带、回收及纯化第25页
     ·纯化产物的连接与转化第25-27页
     ·重组子的鉴定第27页
   ·阳性克隆的保存与测序第27-28页
结果与分析第28-38页
 1. 总 RNA 提取第28页
 2. 双链cDNA 合成第28-29页
 3. cDNA 单酶切第29-30页
 4. cDNA 酶切片段的预扩增第30页
 5. 预扩产物的选择扩增第30-33页
   ·两种选扩程序的比较第30-31页
   ·选择扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳第31-33页
 6. 特异片段的回收和二次 PCR第33页
 7. 差异片段的克隆第33-34页
 8. 差异片段的测序结果和序列同源性分析第34-38页
   ·5 条差异片段的测序结果第34-35页
   ·序列同源性分析结果第35-38页
讨论第38-41页
结论第41-42页
参考文献第42-48页
附录第48-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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