中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
插图和附表清单 | 第7-8页 |
文献综述 | 第8-15页 |
1. 差异表达基因的分离方法概述 | 第8-11页 |
2. cDNA-AFLP 技术的原理及其应用 | 第11-13页 |
3. 单酶切cDNA-AFLP分离差异表达片段的应用 | 第13-15页 |
引言 | 第15-18页 |
材料和方法 | 第18-28页 |
1. 试验材料 | 第18页 |
·玉米近等基因系的构建 | 第18页 |
·玉米栽培与取材 | 第18页 |
2. 仪器设备和试剂 | 第18-19页 |
·仪器设备 | 第18页 |
·化学试剂 | 第18-19页 |
3. 试验方法 | 第19-28页 |
·总 RNA 的提取与总 RNA 池的构建 | 第19-20页 |
·总RNA的提取和检测 | 第19-20页 |
·对生、互生总 RNA 池的构建 | 第20页 |
·单酶切cDNA-AFLP 分析 | 第20-23页 |
·cDNA合成 | 第20-21页 |
·cDNA单酶切和连接 | 第21-22页 |
·cDNA酶切片段的预扩增 | 第22-23页 |
·预扩产物的选择扩增 | 第23页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-25页 |
·胶板的制备 | 第23-24页 |
·电泳 | 第24页 |
·银染 | 第24-25页 |
·差异片段的回收、克隆和鉴定 | 第25-27页 |
·差异片段的回收 | 第25页 |
·二次扩增差异条带、回收及纯化 | 第25页 |
·纯化产物的连接与转化 | 第25-27页 |
·重组子的鉴定 | 第27页 |
·阳性克隆的保存与测序 | 第27-28页 |
结果与分析 | 第28-38页 |
1. 总 RNA 提取 | 第28页 |
2. 双链cDNA 合成 | 第28-29页 |
3. cDNA 单酶切 | 第29-30页 |
4. cDNA 酶切片段的预扩增 | 第30页 |
5. 预扩产物的选择扩增 | 第30-33页 |
·两种选扩程序的比较 | 第30-31页 |
·选择扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-33页 |
6. 特异片段的回收和二次 PCR | 第33页 |
7. 差异片段的克隆 | 第33-34页 |
8. 差异片段的测序结果和序列同源性分析 | 第34-38页 |
·5 条差异片段的测序结果 | 第34-35页 |
·序列同源性分析结果 | 第35-38页 |
讨论 | 第38-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
附录 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |