| 缩略语表 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 实验技术路线 | 第12-13页 |
| 第一部分 CNTF突变体的设计 | 第13-22页 |
| 材料与方法 | 第14-19页 |
| 一、晶体结构及氨基酸序列的数据库检索 | 第14页 |
| 二、三维结构的模建 | 第14-19页 |
| 1.hCNTFRα空间结构的模建 | 第14-15页 |
| 2.CNTF突变体的分子设计 | 第15-19页 |
| 讨论 | 第19-21页 |
| 小结 | 第21-22页 |
| 第二部分 CNTF突变体的构建和表达 | 第22-36页 |
| 一.实验材料 | 第22-23页 |
| 二.实验方法 | 第23-29页 |
| 1.用PCR的方法获得CNTF突变体A和B的DNA | 第23页 |
| 2.pMD-18T/A及pMD-18T/B克隆质粒的构建 | 第23-24页 |
| 3.pThioHisA/A及pThioHisA/B表达质粒的构建 | 第24-25页 |
| 4.pThioHisA/A及pThioHisA/B在大肠杆菌BL21中的表达 | 第25-29页 |
| 三.结果 | 第29-33页 |
| 1.CNTF突变体A和B的PCR扩增结果 | 第29页 |
| 2.pMD-18T/A及pMD-18T/B克隆质粒的构建 | 第29-31页 |
| 3.pThioHisA/A及pThioHisA/B表达质粒的构建 | 第31页 |
| 4.pThioHisA/A及pThioHisA/B在大肠杆菌BL21中的表达 | 第31-33页 |
| 四.讨论 | 第33-35页 |
| 五.小结 | 第35-36页 |
| 第三部分 重组蛋白的复性及纯化工艺的建立 | 第36-56页 |
| 一.实验材料 | 第36-37页 |
| 二.实验方法 | 第37-41页 |
| A.实验室水平的研究 | 第37-38页 |
| B.中试水平的研究 | 第38-41页 |
| 三.结果 | 第41-52页 |
| A.实验室水平的研究 | 第41-45页 |
| B.中试水平的研究 | 第45-52页 |
| 四.讨论 | 第52-55页 |
| 五.小结 | 第55-56页 |
| 第四部分 CNTF突变体的理化性质及生物学活性检测 | 第56-89页 |
| 一.实验材料 | 第56-57页 |
| 二.实验方法 | 第57-61页 |
| 1.CNTF突变体蛋白理化性质的检测 | 第57-58页 |
| 2.生物学活性测定 | 第58-61页 |
| ·鸡胚背根神经节法 | 第58页 |
| ·细胞学活性检测 | 第58-59页 |
| ·正常小鼠减重法 | 第59-61页 |
| 三.结果 | 第61-84页 |
| 1.理化性质检测 | 第61-68页 |
| 2.生物学活性检测 | 第68-84页 |
| ·鸡胚背根神经节法 | 第68-69页 |
| ·细胞学实验 | 第69-70页 |
| ·正常小鼠减重法 | 第70-84页 |
| 四.讨论 | 第84-88页 |
| 五.小结 | 第88-89页 |
| 总结 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-93页 |
| 综述 肥胖症及其药物治疗的研究进展 | 第93-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
