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镉和壬基酚对鲫鱼肝细胞的毒理作用及联合作用的评价

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
引言第12-25页
 1 水环境污染现状第12-13页
 2 污染物的主要类型第13-16页
   ·重金属毒性物质——镉第13-14页
   ·有机有毒物——壬基酚第14-16页
 3 镉、壬基酚的作用机制第16-21页
   ·镉毒性作用机制第16-18页
   ·壬基酚的内分泌干扰机制第18-21页
 4 镉、壬基酚作用的经典指示物第21-23页
   ·金属硫蛋白第21-22页
   ·卵黄蛋白原第22-23页
 5 本实验研究意义第23-25页
第一章 肝细胞原代培养模型的建立第25-32页
 1 材料第26-27页
   ·实验用鱼第26页
   ·试剂和仪器第26页
   ·实验使用溶液的配制第26-27页
 2 实验方法第27-28页
   ·鲫鱼肝细胞的分离第27-28页
   ·细胞的显微形态观察第28页
 3 结果第28-32页
   ·葡萄糖洗必泰的消毒作用第28-29页
   ·细胞分离液的纯化效果第29-30页
   ·两种血清对血细胞凝集及细胞贴壁的影响第30-32页
第二章 镉离子对鲫鱼肝细胞的钙、Ca~(2+)-ATP 酶和金属硫蛋白的作用第32-48页
 1 材料第33-34页
   ·实验用鱼第33页
   ·试剂和仪器第33页
   ·实验使用溶液的配制第33-34页
 2 实验方法第34-39页
   ·鲫鱼肝细胞的分离第34-35页
   ·细胞的显微形态观察第35页
   ·细胞增殖活性检测第35-36页
   ·氯化镉暴露及检测样品的处理第36-37页
   ·钙离子荧光染色第37页
   ·Ca~(2+)-ATP 酶的测定第37-38页
   ·金属硫蛋白的ELISA 检测第38页
   ·镉离子浓度测定第38页
   ·数据处理第38-39页
 3 结果第39-44页
   ·原代培养细胞形态观察第39-40页
   ·细胞增殖活性检测第40-41页
   ·肝细胞内游离钙离子荧光染色第41-42页
   ·氯化镉诱发Ca~(2+)-ATP 酶活力增加第42-43页
   ·氯化镉诱发金属硫蛋白表达量的升高第43-44页
   ·细胞内镉离子浓度第44页
 4 讨论第44-48页
   ·氯化镉对鲫鱼细胞增殖的影响第44-45页
   ·氯化镉对鲫鱼原代培养肝细胞内钙离子的影响第45-46页
   ·氯化镉对肝细胞金属硫蛋白的影响第46-48页
第三章 壬基酚对鲫鱼肝细胞的钙、Ca~(2+)-ATP 酶和金属硫蛋白的作用第48-60页
 1 材料第48-50页
   ·实验用鱼第48-49页
   ·试剂和仪器第49页
   ·实验使用溶液的配制第49-50页
 2 实验方法第50-52页
   ·鲫鱼肝细胞的分离第50-51页
   ·细胞的显微形态观察第51页
   ·细胞增殖活性检测第51页
   ·壬基酚暴露及检测样品的处理第51-52页
 3 结果第52-57页
   ·鲫鱼肝细胞形态观察第52-53页
   ·细胞增殖活性检测第53-54页
   ·NP 对MT 表达量的影响第54-55页
   ·NP 诱导Ca~(2+)-ATP 酶活力增加第55-56页
   ·NP 对细胞内Ca~(2+)的影响第56-57页
 4 讨论第57-60页
   ·NP 对细胞活性的影响第57页
   ·NP 对MT 表达量的影响第57-58页
   ·NP 对细胞内Ca~(2+)的影响第58页
   ·NP 对Ca~(2+)-ATP 酶的影响第58-60页
第四章 镉和壬基酚联合作用的评价第60-69页
 1 材料与方法第60-62页
 2 结果第62-67页
   ·联合毒性评价第62-64页
   ·镉和壬基酚联合作用对Ca~(2+)-ATP 酶活力的影响第64页
   ·镉和壬基酚联合作用对MT 表达量的影响第64-67页
 3 讨论第67-69页
结论第69-70页
参考文献第70-79页
致谢第79页

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