兔骨髓间充质干细胞的体外分离培养和成骨诱导
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 主要英文缩略语 | 第7-8页 |
| 前言 | 第8-11页 |
| 材料和方法 | 第11-22页 |
| 一、材料与试剂 | 第11-12页 |
| 1、试验动物 | 第11页 |
| 2、主要试剂 | 第11页 |
| 3、主要仪器、器皿 | 第11页 |
| 4、培养液和试剂的配制 | 第11-12页 |
| 二、实验方法 | 第12-22页 |
| (一) 兔骨髓间充质干细胞的分离和培养 | 第12-15页 |
| 1．兔MSC的原代培养 | 第12-13页 |
| 1．1 主要试剂与器械 | 第13页 |
| 1．2 步骤 | 第13页 |
| 2． 细胞传代 | 第13-14页 |
| 3． 细胞的冻存和复苏 | 第14-15页 |
| 3．1 细胞冻存 | 第14页 |
| 3．2 细胞复苏 | 第14-15页 |
| 4． HE染色固定细胞、组织观察 | 第15页 |
| (二) 细胞生长的测定 | 第15-16页 |
| 1、细胞计数 | 第15-16页 |
| 2、细胞生长指数的测定 | 第16页 |
| (三) 影响兔MSCs体外生长的因素 | 第16-17页 |
| 1、不同浓度FBS对MSCs生长的影响 | 第16页 |
| 2、不同种植密度对MSCs生长的影响 | 第16页 |
| 3、IGF对MSC细胞增值和细胞总蛋白含量的影响 | 第16-17页 |
| 4、统计学方法 | 第17页 |
| (四) 兔MSCs向成骨细胞的诱导分化和鉴定 | 第17-22页 |
| 结果 | 第22-26页 |
| 1． 兔骨髓间充质干细胞形态观察 | 第22页 |
| 1．1 原代培养 | 第22页 |
| 1．2 MSC的传代增殖 | 第22页 |
| 1．3 经诱导的MSCs | 第22页 |
| 2． MSC的生长曲线 | 第22-23页 |
| 3． 影响兔MSCs体外生长的因素 | 第23-25页 |
| 3．1 不同浓度FBS对MSCs生长的影响 | 第23-24页 |
| 3．2 不同种植密度对MSCs生长的影响 | 第24页 |
| 3．3 IGF对三种细胞增值的影响 | 第24-25页 |
| 4． MSCs免疫细胞化学染色 | 第25-26页 |
| 讨论 | 第26-39页 |
| 一、MSCs的分离纯化方法 | 第26-28页 |
| 二、MSCs的体外扩增培养的形态学 | 第28-29页 |
| 三、MSCs的体外生长动力学 | 第29-30页 |
| 四、MSCs的体外培养的影响因素 | 第30-32页 |
| 五、MSCs表面标记 | 第32-33页 |
| 六、MSCs的多向分化潜能 | 第33-35页 |
| 七、MSC的诱导分化 | 第35-37页 |
| 1． 碱性成纤维细胞生长因子bFGF | 第35-36页 |
| 2． 骨形态发生蛋白BMP | 第36页 |
| 3． 转化生长因子TGF-β | 第36-37页 |
| 4． Dex | 第37页 |
| 八、MSC的成骨作用 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 附图 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 研究生期间发表论文 | 第51-52页 |
| 学位论文评阅及答辨情况表 | 第52页 |
